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熒光鎵的應(yīng)用

2020/10/20 9:12:51

概述[1][2]

熒光鎵 ( Lumogallion , LMG)是一種偶氮試劑,其結(jié)構(gòu)式如圖1 所示,已被成功地應(yīng)用于金屬離子的測(cè)定,如 V、Fe、Al的研究。

應(yīng)用[1-2]

一、核酸是重要的生物大分子,是分子生命學(xué)研究的重要內(nèi)容。核酸的化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)和生物功能具有重要的研究意義,而其定量測(cè)定是研究核酸的基礎(chǔ),對(duì)發(fā)展核酸醫(yī)藥制品、研究核酸生物化學(xué)反應(yīng)以及對(duì)疾病的診斷和防治均有重要的意義。測(cè)定核酸含量的方法有很多種,從最早的定磷法、地衣酚法到目前使用較廣泛的分光光度法、熒光光度法、共振光散射法等,都能靈敏、快速、準(zhǔn)確的應(yīng)用于核酸的測(cè)定。張慧詳細(xì)地介紹熒光光度法在核酸的定量測(cè)定中的應(yīng)用。研究發(fā)現(xiàn)加入 DNA 后熒光鎵的熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng),因此可用于核酸的定量分析。如圖 1 所示熒光鎵—核酸體系的激發(fā)波長(zhǎng)為 485 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為 595 nm。且在 595 nm 處的熒光峰大大增強(qiáng),隨著核酸加入量的增加,熒光強(qiáng)度不斷增強(qiáng),并在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。核酸的加入不影響體系的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng),只使體系的熒光強(qiáng)度發(fā)生變化,因此,熒光鎵可以作為定量測(cè)定核酸的熒光光譜探針。

二、李燕等人研究了在pH2.21的B-R緩沖溶液中,蛋白質(zhì)的加入導(dǎo)致熒光鎵共振瑞利散射信號(hào)增強(qiáng),基于此,建立了一種測(cè)定蛋白質(zhì)的新方法。表面活性劑SDS的加入顯著提高了體系的靈敏度,牛血清白蛋白的濃度在0~4.5μg/mL之間與體系的散射強(qiáng)度呈線性關(guān)系,檢出限為8.14ng/mL。方法已應(yīng)用于人血清樣品中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。同時(shí),利用分光光度法測(cè)定了其不同溫度下的結(jié)合數(shù)、結(jié)合常數(shù)。利用熱力學(xué)方程研究發(fā)現(xiàn)熒光鎵與蛋白質(zhì)之間的主要作用力為靜電引力。

主要參考資料

[1]張慧.熒光鎵作為熒光光譜探針測(cè)定核酸的研究[J].廣東化工,2015,42(16):217-218.

[2] 李燕,宋桂蘭,盧燕,楊興,魏琴.熒光鎵-SDS共振瑞利散射法測(cè)定蛋白質(zhì)的研究[J].分析試驗(yàn)室,2009,28(03):55-58.

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