背景^[1]

Cytochrome C，即細(xì)胞色素C或Cyt-C，是線粒體電子呼吸鏈中的一個(gè)重要蛋白。Cytochrome C在進(jìn)化上高度保守。細(xì)胞凋亡對(duì)于多細(xì)胞生物個(gè)體發(fā)育的正常進(jìn)行，自穩(wěn)平衡的保持及抵御外界各種因素的干擾及在胚胎發(fā)育、造血、免疫系統(tǒng)的成熟及維護(hù)正常組織和器官的細(xì)胞恒定與生長平衡、乃至機(jī)體衰老方面都起著重要作用。

近年來，對(duì)細(xì)胞凋亡的研究已從聚焦細(xì)胞核的改變，轉(zhuǎn)向?qū)τ诰€粒體呼吸鏈變化的研究，而細(xì)胞色素C是呼吸鏈中的一個(gè)基本成分，在氧化還原和能量代謝中起著重要的作用，同時(shí)細(xì)胞色素C是線粒體啟動(dòng)凋亡程序的關(guān)鍵物質(zhì)。細(xì)胞色素C途徑在多種細(xì)胞的凋亡過程中起著關(guān)鍵的凋亡信號(hào)放大作用。大量研究表明，Cyt-C是參與細(xì)胞凋亡不可或缺的重要因子。

在細(xì)胞凋亡的研究中揭示出，3個(gè)與凋亡密切相關(guān)的蛋白細(xì)胞凋亡蛋白酶活化因子（Aapfs）之一的Aapf-2就是Cyt-C，首次證明了Cyt-C參與了細(xì)胞凋亡的過程。近年來，對(duì)Cyt-C的認(rèn)識(shí)已經(jīng)從其對(duì)能量代謝的控制而進(jìn)展為對(duì)其參與凋亡過程的研究，發(fā)現(xiàn)Cyt-C是一個(gè)線粒體起源的細(xì)胞凋亡信號(hào)。成熟的Cyt-C與Cyt-C氧化酶共價(jià)結(jié)合定位于線粒體內(nèi)膜。

正常狀態(tài)下，Cyt-C不能通過外膜，而在NO等因子的誘導(dǎo)下線粒體發(fā)生聚集（用新式激光掃描細(xì)胞計(jì)數(shù)定量分析顯示線粒體的聚集是細(xì)胞色素C釋放的上游事件），Cyt-C便釋放到胞質(zhì)中。Cyt-C的釋放放大了死亡受體途徑，導(dǎo)致II型細(xì)胞（如肝細(xì)胞）凋亡或壞死，而細(xì)胞是發(fā)生凋亡還是壞死與胞內(nèi)ATP水平有關(guān)。當(dāng)還原型Cyt-C釋放以后，若胞內(nèi)ATP仍能維持一定水平，Cyt-C即可通過激活Caspase介導(dǎo)凋亡；反之細(xì)胞會(huì)發(fā)生壞死。

Cytochrome C抗體(Cytochrome C antibody，細(xì)胞色素C抗體)為進(jìn)口分裝，用變性的重組人Cytochrome C作為抗原制備而成的抗Cytochrome C小鼠單克隆抗體。Cytochrome C抗體識(shí)別的是總Cytochrome C (total Cytochrome C)，可以檢測內(nèi)源性的Cytochrome C，未發(fā)現(xiàn)和其它激酶有交叉反應(yīng)。

Cytochrome C抗體可以用于通過Western或免疫熒光檢測線粒體內(nèi)的Cytochrome C的釋放情況，以確定Cytochrome C釋放和凋亡的相關(guān)性，或直接用Cytochrome C釋放來判斷細(xì)胞凋亡的狀況。正常細(xì)胞Cytochrome C的染色集中在線粒體，而凋亡細(xì)胞的Cytochrome C則呈彌散分布。Cytochrome C抗體-20℃保存，Western-抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。

主要參考資料

[1] 王艷杰, 鄧雯, 張鵬飛. 細(xì)胞色素 C 與細(xì)胞凋亡研究進(jìn)展[J]. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2012, 33(7): 89-92.