背景[1-3]
小鼠抗GFAP單克隆抗體是以GFAP為抗原的小鼠單克隆抗體,可以特異性結(jié)合GFAP。小鼠抗GFAP單克隆抗體主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等GFAP檢測實(shí)驗(yàn)。
抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇(表位)和抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性。這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的。除兩者分子構(gòu)型高度互補(bǔ)外,抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸,才有足夠的結(jié)合力。
GFAP是膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein)的英文簡稱,是星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的標(biāo)志物。膠質(zhì)纖維酸性蛋白。神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)是一種Ⅲ型中間絲狀蛋白,以單體形式存在。
在人類當(dāng)中發(fā)現(xiàn)有8種同源異構(gòu)體,相對分子質(zhì)量介于(40-53)×10^3。人類GFAP基因定位于17號染色體長臂2區(qū)1帶上,由9個外顯子和8個內(nèi)含子組成。
GFAP主要分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞,參與細(xì)胞骨架的構(gòu)成并維持其張力強(qiáng)度。其在軟骨細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肌上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、肝星形細(xì)胞也有表達(dá)。但外周系統(tǒng)所表達(dá)的GFAP不能被中樞神經(jīng)系統(tǒng)的GFAP單克隆抗體檢測出,提示兩個來源的GFAP可能在結(jié)構(gòu)上存在差異。GFAP或許對神經(jīng)系統(tǒng)有特異性。
GFAP見于神經(jīng)系統(tǒng)以外疾?。好庖呓M化研究發(fā)現(xiàn):在正常乳腺和乳腺的良性病變組織中,有部分MEC表達(dá)GFAP。乳腺原位癌中殘存的MEC不表達(dá)GFAP。在乳腺原位癌和浸潤性癌中,各種癌細(xì)胞均不表達(dá)GFAP。在乳腺的各種良性病變中,部分EC和間質(zhì)的肌纖維母細(xì)胞可表達(dá)GFAP。但在乳腺癌的間質(zhì)中,即使間質(zhì)纖維化很嚴(yán)重,肌纖維母細(xì)胞也不表達(dá)GFAP,而表達(dá)SMA。
應(yīng)用[4][5]
用于小鼠抑郁癥模型建立及干預(yù)、行為學(xué)和海馬GFAP變化研究
建立小鼠抑郁癥模型,研究其行為學(xué)變化,了解其大腦中GFAP(glial fibrillary acidic protein)的變化,并給予藥物干預(yù),探索抑郁癥模型是否與覓食行為有關(guān),以及覓食行為是否與GFAP相關(guān),和覓食行為所涉及的機(jī)制,為抑郁癥的臨床治療及深入的基礎(chǔ)研究奠定基礎(chǔ)。
方法1.建立小鼠抑郁癥模型:根據(jù)Molina的方法并加以改進(jìn),即慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)方法建立小鼠抑郁模型,評價其有效性。在覓食行為試驗(yàn)中,抑郁癥模型的覓食量改變。
2. 檢測GFAP:利用Western blot和RT-PCR的方法檢測抑郁模型海馬和皮層內(nèi)GFAP的表達(dá)。免疫組化檢測GFAP在海馬中各區(qū)域的表達(dá)。
3. 藥物干預(yù):建立小鼠抑郁癥模型,隨機(jī)將其分為三組,分別給予腹腔注射不同的藥物干預(yù)14d后,觀察其行為學(xué)和GFAP表達(dá)量的改變,探討抑郁癥的發(fā)生機(jī)制。
結(jié)果1.在行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中CUMS抑郁癥模型小鼠行為學(xué)指標(biāo)與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。在覓食實(shí)驗(yàn)中,模型組覓食活動與對照組相比顯著減少差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
2.GFAP蛋白和mRNA表達(dá)水平,GFAP在模型組小鼠海馬中的表達(dá)與對照組相比減少差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),在模型組小鼠皮層中沒有變化。
參考文獻(xiàn)
[1]Exercise Intervention May Prevent Depression[J].S.-B.He,W.-G.Tang,W.-J.Tang,X.-L.Kao,C.-G.Zhang,X.-T.Wong.Int J Sports Med.2012(07)
[2]Chronic exposure to an extremely low‐frequency magnetic field induces depression‐like behavior and corticosterone secretion without enhancement of the hypothalamic–pituitary–adrenal axis in mice[J].Kazuyoshi Kitaoka,Mitsuo Kitamura,Shun Aoi,Noriyuki Shimizu,Kazuo Yoshizaki.Bioelectromagnetics.2012(1)
[3]The antidepressant-like action of a simple selenium-containing molecule,methyl phenyl selenide,in mice[J].Carla Elena Sartori Oliveira,Bibiana Mozzaquatro Gai,Benhur Godoi,Gilson Zeni,Cristina Wayne Nogueira.European Journal of Pharmacology.2012(1-3)
[4]Sex-specific and region-specific changes in BDNF–TrkB signalling in the hippocampus of 5-HT1A receptor and BDNF single and double mutant mice[J].YeeWen Candace Wu,Rachel A.Hill,Maren Klug,Maarten van den Buuse.Brain Research.2012
[5]楊春蕊.小鼠抑郁癥模型建立及干預(yù)、行為學(xué)和海馬GFAP變化研究[D].昆明醫(yī)科大學(xué),2013.