氯化硝基四氮唑藍(lán) (NBT;N8140-Solarbio): 脫氫酶和其它過氧化酶的底物。用于測(cè)定葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase);也是凝血因子I(fibrinogen)的沉淀試劑。也是堿性磷酸酶底物之一，在堿性磷酸酶的催化下生成不溶性的藍(lán)色產(chǎn)物。常用于免疫組化(IHC)、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)和蛋白印跡(WB)等實(shí)驗(yàn)。NBT可作為一種篩查尿道感染的方法。氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)還原法對(duì)血清糖化低密度脂蛋白及極低密度脂蛋白(SG LP-V P)進(jìn)行測(cè)定，依據(jù)呈色的深淺直接用光密度表示SG LP-V P的濃度，并計(jì)算SG LP-V P的指數(shù)，取得的效果非常好。

氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)作為一種重要的化學(xué)試劑，除在生化實(shí)驗(yàn)、臨床體外診斷等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值外，在化妝品行業(yè)也有廣泛應(yīng)用，尤其是在化妝品抗氧化功效檢測(cè)方面作用重大。

抗氧化是美容護(hù)膚界的最熱詞匯之一，抗氧化劑是化妝品起到抗氧化效果的關(guān)鍵組分，它們可與體內(nèi)常見的自由基如羥自由基和超氧陰離子自由基等發(fā)生反應(yīng),防止脂質(zhì)過氧化,起到祛斑、美白、防皺和抗衰老的功能。利用NBT法測(cè)定抗氧化劑活性或測(cè)定活性氧的消除率是評(píng)價(jià)化妝品抗氧化效果的重要參考。 

根據(jù)已公開報(bào)道，韓國(guó)三大化妝品公司之一的株式會(huì)社在檢測(cè)旗下化妝品抗氧化功效時(shí)用的就是NBT法[1]。在專利CN105267268A中，為了測(cè)定抗氧化效果，研發(fā)人員用NBT法測(cè)定由黃嘌呤與黃嘌呤氧化酶生成的活性氧，評(píng)價(jià)檢測(cè)物消除活性氧的效果，即活性氧消除效果。由黃嘌呤與黃嘌呤氧化酶生成活性氧。以在波長(zhǎng)560nm測(cè)定這些活性氧與氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)反應(yīng)而生成的藍(lán)色來測(cè)定活性氧的消除率。

在化妝品抗氧化劑中，SOD、維生素C、維生素E等都是耳熟能詳?shù)拿?。SOD，即超氧化物歧化酶，作為抗氧化劑可使化妝品起到延緩肌膚衰老、祛斑的功效，國(guó)內(nèi)外很多化妝品品牌旗下產(chǎn)品都加入了一定比例的 SOD。如法國(guó)的雅詩(shī)蘭黛石榴水、日本的 SKII 神仙水，以及國(guó)內(nèi)大寶 SOD 蜜等。NBT法可測(cè)定SOD活性，其原理是氮藍(lán)四唑在蛋氨酸和核黃素存在條件下，照光后發(fā)生光化還原反應(yīng)而生成藍(lán)色甲腙，藍(lán)色甲腙在560nm處有光吸收。SOD能抑制NBT的光化還原，其抑制強(qiáng)度與酶活性在一定范圍內(nèi)成正比。

王麗麗等[2]使用NBT法測(cè)定新型化妝品抗氧化劑：DP5-8殼寡糖清除超氧陰離子的能力，并驗(yàn)證了DP5-8殼寡糖較強(qiáng)的抗氧化能力和對(duì)羥自由基和超氧陰離子的清除能力。

參考文獻(xiàn)：

1.人參葉提取物制造方法及包含其為有效成分的化妝品組合物 CN105267268A

2.一種特定聚合度殼寡糖的制備方法及其在化妝品上的應(yīng)用 CN110387392A