Biacore T200

儀器信息

設(shè)備稱謂：生物分子間相互作用分析儀

制造商信息：生產(chǎn)廠商為Cytiva公司

產(chǎn)品型號(hào)：該設(shè)備型號(hào)為Biacore T200

儀器介紹

Biacore T200系統(tǒng)是一個(gè)利用表面等離子共振（SPR）技術(shù)的生物分子相互作用分析平臺(tái)，其通用性和無(wú)標(biāo)記特性使其適用于從藥物研發(fā)初期直至質(zhì)量控制的全過(guò)程。該系統(tǒng)能夠高精度地實(shí)時(shí)分析生物分子間的相互作用，提供包括動(dòng)力學(xué)參數(shù)、親和力、濃度、特異性、選擇性以及熱動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)在內(nèi)的全面信息。通過(guò)直接觀察分子結(jié)合過(guò)程，Biacore T200能夠深入探究蛋白質(zhì)、核酸等多種生物分子間的相互作用，為科學(xué)家理解這些生物分子功能和它們所參與的生物學(xué)過(guò)程提供有力支持。

在SPR實(shí)驗(yàn)中，一個(gè)分子（稱為配體）被固定在傳感器芯片表面，而另一個(gè)分子（分析物）則在流動(dòng)狀態(tài)下與之接觸。這種流動(dòng)條件下的相互作用被精確測(cè)定，并以共振單位（RU）表示，該單位與芯片表面的質(zhì)量變化成正比。通過(guò)SPR實(shí)驗(yàn)，我們可以準(zhǔn)確地測(cè)量出動(dòng)力學(xué)結(jié)合常數(shù)（包括結(jié)合速率ka和解離速率kd）以及親和力（KD），為生物分子相互作用的深入研究提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。

重要信息

技術(shù)參數(shù)概述

Biacore T200系統(tǒng)，基于先進(jìn)的表面等離子體共振（SPR）技術(shù)，展現(xiàn)了卓越的性能特點(diǎn)：

工作原理：利用SPR原理進(jìn)行生物分子相互作用分析。

溫控范圍：樣品艙與分析溫控均達(dá)到4至45°C，滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。

樣品兼容性：支持多種規(guī)格的樣品容器，包括7mm和16mm試劑瓶、1.5mL Eppendorf管以及96孔板和384孔板。

在線脫氣：配備自動(dòng)脫氣功能，確保運(yùn)行緩沖液無(wú)氣泡干擾。

背景扣除：采用串聯(lián)上下游通道設(shè)計(jì)，實(shí)現(xiàn)最精確的背景扣除。

樣品回收：具備自動(dòng)回收功能，便于后續(xù)質(zhì)譜分析。

緩沖液切換：支持四種緩沖液自動(dòng)切換，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。

檢測(cè)范圍：折射率范圍為1.33至1.40，信號(hào)響應(yīng)動(dòng)態(tài)范圍高達(dá)1至70000RU。

基線穩(wěn)定性：基線噪音低于0.03RU，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

結(jié)合速率：能夠檢測(cè)的結(jié)合速率常數(shù)范圍廣泛，從10³至3×10? M?¹S?¹。

功能特色詳解

Biacore T200系統(tǒng)不僅功能強(qiáng)大，而且應(yīng)用廣泛：

特異性驗(yàn)證：準(zhǔn)確確認(rèn)蛋白相互作用的特異性。

全面分析：對(duì)蛋白質(zhì)相互作用進(jìn)行親和力與動(dòng)力學(xué)的深入分析。

蛋白質(zhì)組學(xué)研究：支持蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域的深入研究。

活性分子篩選：篩選與靶蛋白結(jié)合的活性蛋白分子。

復(fù)雜樣本分析：直接分析臨床標(biāo)本、組織及細(xì)胞勻漿等復(fù)雜樣本。

新藥研發(fā)：助力新藥研發(fā)的全過(guò)程，包括初篩、先導(dǎo)化合物優(yōu)化等。

藥物篩選：針對(duì)不同藥靶篩選藥物分子，提高研發(fā)效率。

復(fù)合物分析：分析多分子復(fù)合物的結(jié)構(gòu)和組裝順序，揭示瞬時(shí)結(jié)合作用。

主要應(yīng)用方向

該系統(tǒng)主要聚焦于：

動(dòng)力學(xué)參數(shù)：精確測(cè)量結(jié)合速率常數(shù)（ka、kd）及親和力（KD）。

分子結(jié)合：分析大分子與小分子的結(jié)合特性。

應(yīng)用領(lǐng)域拓展

Biacore T200系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域：

基礎(chǔ)生命科學(xué)：涵蓋蛋白質(zhì)組學(xué)、癌癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、免疫學(xué)等。

藥物研發(fā)：從初篩到臨床前和臨床試驗(yàn)效果評(píng)價(jià)，全程助力。

生物制劑質(zhì)控：確保生物制劑的質(zhì)量與安全。

食品安全：檢測(cè)獸藥殘留、維生素含量等，保障食品安全。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)注意事項(xiàng)

在使用Biacore T200系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，需注意以下事項(xiàng)：

通道分配：每次實(shí)驗(yàn)使用兩個(gè)通道（1和2或3和4），其中一個(gè)為參比通道（無(wú)配體），另一個(gè)為樣品通道（固定配體）。

流速控制：推薦配體偶聯(lián)時(shí)的流速為10µl/min。

偶聯(lián)量估算：根據(jù)目標(biāo)Rmax（建議為25左右）和實(shí)驗(yàn)條件，合理估算配體偶聯(lián)量。對(duì)于蛋白分析物，將RL設(shè)置為Rmax低于150；對(duì)于小分子分析物，建議采用低密度偶聯(lián)以減少干擾。

配體固定：可通過(guò)不可逆捕獲或可逆捕獲方式固定配體，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活選擇。

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