概述[1-2]
腎小球內(nèi)皮細(xì)胞被覆于腎小球毛細(xì)血管壁腔側(cè)，與血流直接接觸，是腎小球?yàn)V過(guò)膜的道屏障，可粘附細(xì)菌和白細(xì)胞，修復(fù)基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞在免疫學(xué)和病理生理學(xué)領(lǐng)域中具有重要的研究?jī)r(jià)值。
生理功能[2]
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。
相關(guān)研究[3-4]
有實(shí)驗(yàn)觀察高糖和甘露聚糖結(jié)合凝集素(MBL)途徑補(bǔ)體激活對(duì)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞(HRGEC)表達(dá)炎癥因子白細(xì)胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的影響，探索糖尿病腎病(DN)新的發(fā)病機(jī)制。方法是體外培養(yǎng)正常HRGEC，隨機(jī)分為正常糖組(5mmol/LD-葡萄糖)、甘露醇組(5mmol/LD-葡萄糖+25mmol/L甘露醇)和高糖組(30mmol/LD-葡萄糖)，分別培養(yǎng)24h后，采用實(shí)時(shí)熒光定量RCR法(real-time PCR)檢測(cè)各組細(xì)胞中IL-6和TNF-α mRNA的表達(dá)，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-6和TNF-α的蛋白濃度。
另將HRGEC隨機(jī)分為單純高糖組和高糖+MBL組，兩組用30mmol/LD-葡萄糖培養(yǎng)24h后，加入等量30%MBL缺乏的人血清，高糖+MBL組另外加入1μg/mL MBL，繼續(xù)培養(yǎng)4h。采用流式細(xì)胞技術(shù)和免疫熒光染色分別觀察細(xì)胞表面MBL、C3和膜攻擊復(fù)合物(MAC)的沉積；同時(shí)檢測(cè)兩組IL-6、TNF-α mRNA和蛋白的表達(dá)。
結(jié)果與正常糖組和甘露醇組相比，高糖組細(xì)胞IL-6、TNF-α mRNA及蛋白表達(dá)增加(P0.05)。流式細(xì)胞技術(shù)證實(shí)，高糖+MBL組細(xì)胞表面有明顯的MBL和C3的共沉積，免疫熒光染色顯示細(xì)胞表面有明顯MAC沉積，單純高糖組無(wú)上述現(xiàn)象；與單純高糖組相比，高糖+MBL組細(xì)胞IL-6、TNF-α mRNA以及蛋白表達(dá)增加(P0.05)。結(jié)論高糖可以誘導(dǎo)HRGEC炎癥因子過(guò)表達(dá)；高糖和MBL共同存在時(shí)，MBL補(bǔ)體途徑激活，炎癥因子表達(dá)明顯增加，提示MBL補(bǔ)體途徑激活作為可能的未知發(fā)病機(jī)制對(duì)DN及其炎癥狀態(tài)起促進(jìn)作用。
此外，還有研究探討腫瘤壞死因子α（TNFα）對(duì)培養(yǎng)的人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞（HUGEC）表達(dá)單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1）的影響以及HUGEC的條件培養(yǎng)基對(duì)單核細(xì)胞（MC）的趨化作用及抗MCP-1抗體對(duì)單核細(xì)胞遷移的影響。采用原位雜交技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞ELISA法觀察MCP-1基因及蛋白表達(dá)。用改良的小室微孔濾膜法測(cè)定TNFα刺激HUGEC后的條件培養(yǎng)基對(duì)MC的趨化作用及抗MCP-1抗體對(duì)MC遷移的影響。結(jié)果顯示：1）在不加刺激條件下培養(yǎng)的HUGEC弱表達(dá)MCP-1基因及蛋白，50ng/mlTNFα刺激后，6小時(shí)即有MCP-1蛋白表達(dá)增強(qiáng)，于12小時(shí)達(dá)高峰，不同濃度的TNFα（25、50、100ng/ml）刺激HUGEC6小時(shí)后，與正常對(duì)照組相比差異顯著。2）TNFα刺激HUGEC后的條件培養(yǎng)基對(duì)MC有明顯趨化作用，并被抗MCP-1抗體抑制。結(jié)論HUGEC在TNFα誘導(dǎo)下，其MCP-1的表達(dá)增強(qiáng)，其條件培養(yǎng)基對(duì)MC有趨化作用，從而可能招引單核細(xì)胞遷入內(nèi)皮下間隙。
主要參考資料
[1] 現(xiàn)代藥學(xué)名詞手冊(cè)
[2] 內(nèi)科學(xué)·卷
[3] 武曉慧， 黃頌敏， 樊文星， 等. 高糖和 MBL 途徑的補(bǔ)體激活對(duì)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá) IL-6， TNF-α 的影響[D]. ， 2011.