背景^[1-6]

Agar(瓊脂粉)由海藻中提取的多糖體，是目前世界上用途最廣泛的海藻膠之一。它在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、日用化工、生物工程等許多方面有著廣泛的應(yīng)用，瓊脂用于食品中能明顯改變食品的品質(zhì)，提高食品的檔次。價格很高。其特點：具有凝固性，穩(wěn)定性，能與一些物質(zhì)形成絡(luò)合物等物理化學(xué)性質(zhì)，可用作增稠劑,凝固劑，懸浮劑，乳化劑，保鮮劑和穩(wěn)定劑。瓊脂平板或培養(yǎng)皿用于使用瓊脂和其他營養(yǎng)素的混合物提供生長培養(yǎng)基，其中可以在顯微鏡下培養(yǎng)和觀察微生物，包括細(xì)菌和真菌。

瓊脂對許多生物來說是難以消化的，因此微生物生長不會影響使用的凝膠并且它保持穩(wěn)定。瓊脂的最有用特性是它的凝點和熔點之間的溫度相差很大。它在水中需加熱至95℃時才開始熔化，熔化后的溶液溫度需降到40℃時才開始凝固，所以它是配制固體培養(yǎng)基的凝固劑。用瓊脂配制的固體培養(yǎng)基，可用以進(jìn)行高溫培養(yǎng)而不熔化，在凝固之前接種時，也不致將培養(yǎng)物燙死。因此，瓊脂是制備各種生物培養(yǎng)基中應(yīng)用最廣泛的一種凝固劑。瓊脂的濃度，通常是液體培養(yǎng)基的1～1.5%。

瓊脂通常作為粉末商業(yè)銷售，其可以與水混合并且在用作生長培養(yǎng)基之前與明膠類似地制備。將其他成分添加到瓊脂中以滿足微生物的營養(yǎng)需求。瓊脂糖培養(yǎng)基是多孔的，因此可用于測量微生物的運動性和遷移性。凝膠的孔隙率與培養(yǎng)基中瓊脂糖的濃度直接相關(guān)，因此可以根據(jù)實驗?zāi)繕?biāo)選擇不同濃度。常見的鑒定分析包括在營養(yǎng)瓊脂塊內(nèi)深處培養(yǎng)生物樣品。

細(xì)胞將嘗試在凝膠結(jié)構(gòu)內(nèi)生長。在整個凝膠中，運動物種將能夠緩慢地遷移，然后可以看到滲透速率，而非運動物種將僅沿著由侵入性初始樣品沉積引入的現(xiàn)在空路徑顯示生長。通常用于測量趨化性和趨化性的另一種設(shè)置利用瓊脂糖下細(xì)胞遷移測定法，其中在細(xì)胞群和化學(xué)引誘物之間放置一層瓊脂糖凝膠。隨著濃度梯度從化學(xué)引誘物擴(kuò)散到凝膠中，隨后可以使用顯微照相術(shù)觀察需要不同刺激水平遷移的各種細(xì)胞群，因為它們沿著梯度向上穿過凝膠向著重力隧穿。

瓊脂廣泛用于植物生物學(xué)，因為它補充有營養(yǎng)和維生素混合物，其允許在無菌條件下培養(yǎng)皿中的幼苗發(fā)芽（假定種子也被滅菌）。擬南芥的營養(yǎng)和維生素補充是大多數(shù)實驗條件下的標(biāo)準(zhǔn)。一般使用Murashige＆Skoog（MS）營養(yǎng)混合物和Gamborg的B5維生素混合物。1.0％瓊脂/0.44％MS+維生素dH 2 O溶液適合于正常生長溫度之間的生長培養(yǎng)基。當(dāng)使用瓊脂時，在任何生長培養(yǎng)基中，重要的是要知道瓊脂的凝固是pH依賴性的。凝固的范圍在5.4-5.7之間。通常，KOH的應(yīng)用是需要提高pH值在該范圍內(nèi)。一般準(zhǔn)則是每250ml GM約600μl0.1MKOH。可以使用高壓釜的液體循環(huán)對整個混合物進(jìn)行滅菌。

應(yīng)用^[7][8]

Agar(瓊脂粉)可用于瓊脂糖凝膠電泳：

蛋白質(zhì)和核酸會根據(jù)pH不同帶有不同電荷，在電場中受力大小不同，因此跑的速度不同，根據(jù)這個原理可將其分開。電泳緩沖液的pH在6~9之間，離子強度0.02~0.05為最適。常用1%的瓊脂糖作為電泳支持物。瓊脂糖凝膠約可區(qū)分相差100bp的DNA片段，其分辨率雖比聚丙烯酰胺凝膠低，但它制備容易，分離范圍廣。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb，利用脈沖電泳，可分離高達(dá)10^7bp的DNA片段。

參考文獻(xiàn)

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