T4 RNA Ligase，即T4 RNA連接酶，是一種ATP-依賴的可以催化單鏈RNA、單鏈DNA或單核苷酸分子間或分子內(nèi)5'-P末端與3'-OH末端之間形成磷酸二酯鍵的酶。

來源

重組 T4 RNA 連接酶由大腸桿菌表達(dá)，表達(dá)基因的來源為T4嗜菌體。

特性

（1）連接效率高

（2）活性強(qiáng)，穩(wěn)定性高，成本低

應(yīng)用

重組 T4 RNA 連接酶主要用于RNA和RNA之間的連接，連接時(shí)需要5'磷酸基團(tuán)和3'羥基的存在。不僅可以進(jìn)行RNA分子間的連接，也可以進(jìn)行RNA分子(最短8個(gè)堿基)的環(huán)化連接。

重組 T4 RNA 連接酶可以用于RNA和單核苷酸之間的連接，單核苷酸必須為5'和3'均磷酸化的形式，此時(shí)常用于RNA的3'末端標(biāo)記。

其也可以用于DNA和RNA之間的連接。當(dāng)DNA提供5'磷酸基團(tuán)，RNA提供3'羥基時(shí)，連接效率較高；當(dāng)DNA提供3'羥基，RNA提供5'磷酸基團(tuán)時(shí)，連接效率非常低。

其也可以用于DNA和DNA之間的連接，但連接效率非常低。主要用于DNA的環(huán)化連接，例如5' RACE中的cDNA環(huán)化。DNA和DNA之間的連接盡管可以進(jìn)行，但比較困難。