脂肪酶(Lipase，甘油酯水解酶)隸屬于羧基酯水解酶類，能夠逐步的將甘油三酯水 解成甘油和脂肪酸。脂肪酶存在于含有脂肪的動、植物和微生物(如霉菌、細(xì)菌等)組織中。 包括磷酸酯酶、固醇酶和羧酸酯酶。脂肪酸廣泛的應(yīng)用于食品、藥品、皮革、日用化工等方 面脂肪酶廣泛的存在于動植物和微生物中。
脂肪酶是一類具有多種催化能力的酶，可以催化三酰甘油酯及其他-些水不溶性酯類的 水解、醇解、酯化、轉(zhuǎn)酯化及酯類的逆向合成反應(yīng)，除此之外還表現(xiàn)出其他一些酶的活性， 如磷脂酶、溶血磷脂酶、膽固醇酯酶、酰肽水解酶活性等(Hara; Schmid)。脂肪酶不同 活性的發(fā)揮依賴于反應(yīng)體系的特點(diǎn)，如在油水界面促進(jìn)酯水解，而在有機(jī)相中可以酶促合成 和酯交換。

植物中含脂肪酶較多的是油料作物的種子,如蓖 麻籽、油菜籽，當(dāng)油料種子發(fā)芽時(shí)，脂肪酶能與其他的酶協(xié)同發(fā)揮作用催化分解油脂類物質(zhì) 生成糖類，提供種子生根發(fā)芽所必需的養(yǎng)料和能量;動物體內(nèi)含脂肪酶較多的是高等動物的 胰臟和脂肪組織，在腸液中含有少量的脂肪酶，用于補(bǔ)充胰脂肪酶對脂肪消化的不足，在肉 食動物的胃液中含有少量的丁酸甘油酯酶。

脂肪酶，全稱為三酰基甘油水解酶，它能夠在脂-水界面上催化酯鍵水解，可以催化三酰甘油酯及其它一些水不溶性酯類的水解、醇解、酯化、轉(zhuǎn)酯化及酯類的逆向合成反應(yīng)。脂肪酶廣泛存在動植物和微生物中，由于微生物種類多、分布廣、適應(yīng)性強(qiáng)、進(jìn)化快，在微生物中的脂肪酶往往具有比動植物來源的脂肪酶具有更廣的作用溫度、pH和底物特異性等優(yōu)勢。微生物是工業(yè)用脂肪酶的主要來源。
脂肪酶是一類能夠作用于羧酸酯鍵的水解酶。脂肪酶的生物學(xué)特性是將甘油三酯水解為甘油二酯、單甘酯、脂肪酸及甘油。另外，脂肪酶除了具有水解羧酸酯鍵的天然作用外，在非水相體系中，還能夠催化酯化、酯交換和轉(zhuǎn)酯化等反應(yīng)的進(jìn)行。脂肪酶的這些特性使得其被廣泛的應(yīng)用于食品、藥物、洗滌劑、皮革制品、造紙工業(yè)以及生物柴油的制造中。

脂肪酶是重要的工業(yè)酶制劑品種之一，可以催化解脂、酯交換、酯合成等反應(yīng)，廣泛應(yīng) 用于油脂加工、食品、醫(yī)藥、日化等工業(yè)。不同來源的脂肪酶具有不同的催化特點(diǎn)和催化活 力。其中用于有機(jī)相合成的具有轉(zhuǎn)酯化或酯化功能的脂肪酶的規(guī)?；a(chǎn)對于酶催化合成精 細(xì)化學(xué)品和手性化合物有重要意義。
脂肪酶是一種特殊的酯鍵水解酶，可將甘油酯(油、脂)水解，在不同階段可釋放出脂肪酸、甘油二酯、甘油單酯 及甘油。水解生成的脂肪酸，可以用標(biāo)準(zhǔn)的堿溶液滴定，以滴定值表示酶活力。
脂肪酶在微生物中有廣泛的分布，其產(chǎn)生菌主要是霉菌和細(xì)菌。已經(jīng)公布的適用于甘油 三酯加工的不同來源的脂肪酶有33種，其中18種來自霉菌，7種來自細(xì)菌。

一種采用固定化馬抗體提取純化脂肪酶的方法，包括步驟：

S1：將產(chǎn)脂肪酶的假單胞菌ATCC21808的單一菌落置于裝有25mL搖瓶培養(yǎng)液的250mL搖瓶中，在28℃、200rpm條件下培養(yǎng)20h，然后按10％的接種量轉(zhuǎn)入發(fā)酵培養(yǎng)液中，在28℃、200rpm條件下培養(yǎng)68h，得到發(fā)酵液；其中，每升搖瓶培養(yǎng)液中包括：酵母提取物5g、蛋白胨5g、植物油10g，余量為水；pH值為7.0；每升發(fā)酵培養(yǎng)液中包括：酵母提取物10g、蛋白胨5g、NaCl0.5g、植物油10g，余量為水；pH值為7.0；

S2：將發(fā)酵液離心，收集上清液，得到脂肪酶粗酶液；其中，離心是采用高速冷凍離心機(jī)，在4℃、10800g條件下離心15min；

S3：將脂肪酶粗酶液上固定化馬抗體柱，上柱期間，檢測流出液的脂肪酶活性，直到有脂肪酶活性流出，停止上液；之后用pH值為7.2的0.1M的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液洗柱，再采用pH值為3的0.1M磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液洗脫，收集洗脫液，得到純化后的脂肪酶；并且待酶流出后，立即用pH值為8的1M的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液洗柱至中性，也用該溶液調(diào)洗脫液至pH值至7；其中，固定化馬抗體柱的制備方法包括步驟：選4匹蒙古馬(重量和對應(yīng)的年齡分別為：重量為240公斤且年齡為3歲、重量為290公斤且年齡為5歲、重量為320公斤且年齡為7歲、重量為360公斤且年齡為10歲)，每兩周免疫一次，共進(jìn)行12周的免疫，每次2mL，劑量分別為15mg脂肪酶加等量的弗氏完全佐劑，多點(diǎn)皮下免疫，ELISA檢測抗體滴度大于1：10000后收集抗血清；將抗血清離心除去細(xì)胞成分和其他沉淀物，收集上清液后采用proteinA或proteinG親和層析柱純化出多克隆抗體；將多克隆抗體與活化的Sepharose2B連接，得到固定化馬抗體柱；

S4：在純化后的脂肪酶中加入聚乙二醇，使脂肪酶沉淀；之后離心，收集沉淀；將沉淀透析后凍干干燥，得到脂肪酶，酶活經(jīng)測定達(dá)15-25萬單位/克；其中，離心是在4℃、000g條件下離心8min。