1~ 什么是鞘液
鞘液(Sheath Fluid)是一種在流式細(xì)胞術(shù)、血細(xì)胞分析儀等多種細(xì)胞分析技術(shù)中廣泛應(yīng)用的液體試劑。它主要起到包裹樣本細(xì)胞或微粒的作用,就像給它們穿上一層 “保護(hù)鞘”,使得樣本能夠在儀器的檢測(cè)系統(tǒng)中穩(wěn)定、有序地流動(dòng),確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。
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2~ 鞘液的成分
緩沖鹽溶液:通常包含磷酸鹽緩沖液(PBS)或其他合適的緩沖體系,如 HEPES 緩沖液。這些緩沖鹽的主要作用是維持鞘液的 pH 值穩(wěn)定。例如,PBS 能夠?qū)?pH 值穩(wěn)定在 7.2 - 7.4 左右,這一接近生理環(huán)境的 pH 范圍有助于保護(hù)細(xì)胞的完整性和活性,防止細(xì)胞因?yàn)?pH 值的劇烈變化而受損。
滲透壓調(diào)節(jié)劑:如氯化鈉(NaCl)等成分,用于調(diào)節(jié)鞘液的滲透壓。合適的滲透壓能夠防止細(xì)胞因?yàn)槲蛎浕蚴櫩s而改變其形態(tài)和生理特性。在正常生理?xiàng)l件下,人體細(xì)胞內(nèi)的滲透壓與細(xì)胞外環(huán)境(如血液)的滲透壓是平衡的,鞘液的滲透壓一般會(huì)被調(diào)節(jié)到與生理滲透壓相近的水平,以維持細(xì)胞的正常形態(tài)和功能。
防腐劑:為了防止鞘液在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中被微生物污染,可能會(huì)添加少量的防腐劑。常見(jiàn)的有疊氮鈉(NaN?)或 ProClin 系列防腐劑。這些防腐劑能夠抑制細(xì)菌、真菌等微生物的生長(zhǎng)繁殖,但在使用過(guò)程中需要注意其濃度,因?yàn)檫^(guò)高的防腐劑濃度可能對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。
3~ 鞘液在流式細(xì)胞術(shù)中的作用
(一)聚焦樣本流
- 在流式細(xì)胞儀中,樣本流被鞘液包圍,鞘液以高速流動(dòng),通過(guò)流體動(dòng)力學(xué)原理使樣本流在鞘液的中心形成一個(gè)非常細(xì)的柱狀流。這就好比把樣本細(xì)胞像珠子一樣串在一條細(xì)細(xì)的線上,確保每個(gè)細(xì)胞能夠逐個(gè)通過(guò)檢測(cè)區(qū)域,避免細(xì)胞之間的相互干擾和聚集,從而提高檢測(cè)的分辨率和準(zhǔn)確性。
- 例如,在檢測(cè)血液中的不同類(lèi)型白細(xì)胞時(shí),如果沒(méi)有鞘液的聚焦作用,白細(xì)胞可能會(huì)隨機(jī)分布,在檢測(cè)過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)多個(gè)細(xì)胞同時(shí)通過(guò)檢測(cè)區(qū)域的情況,導(dǎo)致無(wú)法準(zhǔn)確區(qū)分不同類(lèi)型的白細(xì)胞,而鞘液能夠有效地解決這個(gè)問(wèn)題。
(二)減少樣本流與管壁的接觸
- 鞘液的存在可以減少樣本流與儀器管道內(nèi)壁的接觸。這是因?yàn)闃颖玖鞅话谇室褐虚g,與管壁隔離開(kāi)來(lái)。如果樣本流直接與管壁接觸,可能會(huì)由于管壁的吸附作用而損失部分細(xì)胞,或者因?yàn)楣鼙诘哪Σ亮?dǎo)致細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,影響檢測(cè)結(jié)果。
- 以血細(xì)胞分析儀為例,血液樣本在經(jīng)過(guò)復(fù)雜的管道系統(tǒng)時(shí),鞘液的包裹能夠使血液細(xì)胞順利通過(guò)管道,避免血細(xì)胞吸附在管壁上,從而保證了樣本的完整性和檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
(三)提供穩(wěn)定的檢測(cè)環(huán)境
- 鞘液的物理和化學(xué)性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定,能夠?yàn)闃颖炯?xì)胞提供一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的環(huán)境。它的溫度、pH 值和滲透壓等因素在儀器運(yùn)行過(guò)程中基本保持不變,這對(duì)于保持細(xì)胞的生理狀態(tài)非常重要。
- 比如,在長(zhǎng)時(shí)間的檢測(cè)過(guò)程中,由于儀器內(nèi)部可能會(huì)產(chǎn)生熱量等因素導(dǎo)致溫度變化,而鞘液能夠在一定程度上緩沖這種溫度變化對(duì)細(xì)胞的影響,維持細(xì)胞在一個(gè)相對(duì)適宜的溫度環(huán)境中,從而保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的可靠性。
4~ 鞘液在其他技術(shù)中的應(yīng)用
- 微流控芯片技術(shù):在微流控芯片中,鞘液也有類(lèi)似的應(yīng)用。它可以幫助控制樣本在微小通道中的流動(dòng)方向和位置,實(shí)現(xiàn)對(duì)微量樣本的精準(zhǔn)操控。例如,在一些基于微流控芯片的細(xì)胞分選或生化分析應(yīng)用中,鞘液能夠引導(dǎo)樣本細(xì)胞流向特定的檢測(cè)區(qū)域或分離通道,提高分析的效率和精度。
- 細(xì)胞分選技術(shù):在一些需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分選的技術(shù)中,鞘液可以與電場(chǎng)、磁場(chǎng)等物理場(chǎng)相結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)不同類(lèi)型細(xì)胞的分離。例如,在熒光激活細(xì)胞分選(FACS)技術(shù)中,鞘液包裹的樣本細(xì)胞在通過(guò)激光檢測(cè)區(qū)域后,根據(jù)細(xì)胞所標(biāo)記的熒光信號(hào),通過(guò)施加適當(dāng)?shù)碾妶?chǎng)使帶有特定熒光標(biāo)記的細(xì)胞被分選到不同的收集容器中,而鞘液在這個(gè)過(guò)程中起到了穩(wěn)定細(xì)胞流動(dòng)和協(xié)助分選的作用。
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