美國(guó)的 Jackson ImmunoResearch Inc. 是一家在全球都享有盛譽(yù)的二抗生產(chǎn)商，自 1982 年成立以來(lái)，便一直專注于親和純化二抗和純化免疫球蛋白的生產(chǎn)以及偶聯(lián)相關(guān)工作。在過(guò)去的 30 余年間，Jackson ImmunoResearch Inc. 持續(xù)發(fā)展，其生產(chǎn)的二抗有著諸多優(yōu)勢(shì)，深受國(guó)際科研學(xué)者與工業(yè)客戶的喜愛(ài)。

在種類方面，Jackson 的二抗極為豐富。它涵蓋了眾多物種，能夠滿足不同研究對(duì)象的需求；標(biāo)記形式多樣，無(wú)論是熒光標(biāo)記、酶標(biāo)記還是其他類型的標(biāo)記，都應(yīng)有盡有；應(yīng)用范圍廣泛，無(wú)論是基礎(chǔ)科研實(shí)驗(yàn)，還是工業(yè)應(yīng)用場(chǎng)景，都能發(fā)揮重要作用。而且，Jackson 的二抗性價(jià)比極高，在質(zhì)量?jī)?yōu)秀的同時(shí)，價(jià)格合理，能為客戶提供高價(jià)值的產(chǎn)品。更值得一提的是，該公司供貨速度極快，能夠快速響應(yīng)客戶需求，保證科研和生產(chǎn)工作的高效進(jìn)行。

廣泛的應(yīng)用范圍

二抗是一種在其他宿主體內(nèi)制備而成的抗體，它能夠與一抗或者一抗片段相結(jié)合，并且其上面一般連接有酶、熒光素之類的標(biāo)簽。Jackson ImmunoResearch公司所生產(chǎn)的二抗可在以下領(lǐng)域中得到應(yīng)用：

• 免疫熒光：借助熒光標(biāo)記的抗體對(duì)細(xì)胞或組織中的特定抗原進(jìn)行定位、定性及定量分析的技術(shù)，通過(guò)熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)來(lái)呈現(xiàn)抗原的分布及表達(dá)情況。
• 免疫組織化學(xué)：利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，在組織切片上對(duì)特定抗原進(jìn)行檢測(cè)和定位的方法，可通過(guò)顯色反應(yīng)等使抗原所在位置呈現(xiàn)出可見的顏色變化，從而直觀了解組織中抗原的表達(dá)狀態(tài)。
• 免疫細(xì)胞化學(xué)：主要針對(duì)細(xì)胞水平，運(yùn)用特異性抗體來(lái)識(shí)別細(xì)胞內(nèi)的抗原成分，通過(guò)相應(yīng)的標(biāo)記和檢測(cè)手段，明確抗原在細(xì)胞內(nèi)的分布、含量等情況，常用的檢測(cè)方式包括熒光標(biāo)記、酶標(biāo)記等。
• Western blotting：又稱為蛋白質(zhì)印跡法，是將蛋白質(zhì)從電泳凝膠轉(zhuǎn)移至固相支持物（如硝酸纖維素膜等）上，然后利用特異性抗體對(duì)目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)，可用于分析蛋白質(zhì)的表達(dá)水平、分子量大小等。
• 流式細(xì)胞術(shù)：通過(guò)對(duì)處于快速直線流動(dòng)狀態(tài)下的細(xì)胞或微粒進(jìn)行逐個(gè)檢測(cè)，利用特異性抗體標(biāo)記細(xì)胞表面或內(nèi)部的抗原，結(jié)合流式細(xì)胞儀可對(duì)細(xì)胞的多種物理、化學(xué)特性（如大小、粒度、熒光強(qiáng)度等）進(jìn)行分析，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分類、計(jì)數(shù)及對(duì)特定細(xì)胞群體的研究。
• 原位雜交：在保持細(xì)胞或組織原有形態(tài)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織內(nèi)的特定核酸序列進(jìn)行雜交，以檢測(cè)特定基因在細(xì)胞或組織中的表達(dá)定位情況，可用于研究基因在不同細(xì)胞、組織中的時(shí)空表達(dá)規(guī)律。
• 電子顯微鏡：利用電子束代替可見光作為照明源，其分辨率遠(yuǎn)高于光學(xué)顯微鏡，能夠觀察到細(xì)胞、組織等微觀結(jié)構(gòu)的更精細(xì)細(xì)節(jié)，可與免疫標(biāo)記等技術(shù)結(jié)合，用于研究抗原在超微結(jié)構(gòu)水平上的分布情況。
• 超級(jí)解析度顯微鏡：一種突破了傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡分辨率極限的顯微鏡技術(shù)，通過(guò)特定的光學(xué)原理和圖像處理方法，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)微小結(jié)構(gòu)及分子的高分辨率成像，可用于深入探究細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)和分子的相互作用等，常與免疫標(biāo)記等手段配合使用。
• 雙光子顯微鏡：基于雙光子激發(fā)原理的顯微鏡技術(shù)，具有對(duì)樣品損傷小、穿透深度深等優(yōu)點(diǎn)，可用于在活細(xì)胞、活體組織等情況下對(duì)細(xì)胞內(nèi)特定結(jié)構(gòu)或分子進(jìn)行實(shí)時(shí)觀察，常結(jié)合免疫標(biāo)記等方法用于研究生物體內(nèi)的生理過(guò)程。

• ELISA：即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，是一種將抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后通過(guò)酶標(biāo)記的抗體或抗原進(jìn)行反應(yīng)，最后借助酶與底物的顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)抗原或抗體含量的免疫測(cè)定方法，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域的檢測(cè)工作。

 齊全的二抗品種

Whole IgG抗體是從抗血清中完整分離出來(lái)的分子。它包含一個(gè)Fc部分以及兩個(gè)能夠與抗原相結(jié)合的Fab部分，這種結(jié)構(gòu)使其呈現(xiàn)二價(jià)特性。在多數(shù)情形下，Whole IgG抗體都能適用，而且其性價(jià)比是最高的。 F(ab’)2片段抗體則是通過(guò)胃蛋白酶對(duì)IgG進(jìn)行消化處理，將Fc部分去除后所得到的。剩余的兩個(gè)Fab部分依靠二硫鍵相連，這兩個(gè)Fab部分可與抗原結(jié)合，且依然保持二價(jià)。這種抗體適用于某些特定的情況，比如需要避免抗體與Protain A或G相結(jié)合的時(shí)候，又或者是在處理有Fc受體的活細(xì)胞，防止抗體與之結(jié)合的情況。

Fab片段抗體是經(jīng)由木瓜蛋白酶對(duì)IgG進(jìn)行消化而獲得的。這類抗體僅具備一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。它們可用于封閉內(nèi)源性的免疫球蛋白，或者在開展使用相同物種來(lái)源一抗的多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)暴露的免疫球蛋白進(jìn)行封閉。 Jackson二抗該如何選擇呢？ 步驟一：對(duì)三種親和純化二抗形式的選擇——Whole IgG、F(ab')2片段或者Fab片段。 步驟二：明確一抗的物種來(lái)源?？贵w是依照一抗物種來(lái)源的字母表順序來(lái)排列的。例如，若一抗是來(lái)源于小鼠的，那就查找“anti - mouse”。 步驟三：挑選二抗的物種來(lái)源。 步驟四：確定二抗的特異性。需要注意的是，不同來(lái)源的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)相似，抗體的生成過(guò)程也類似?？鼓骋晃锓N的抗體有可能和其他物種發(fā)生交叉反應(yīng)，除非預(yù)先經(jīng)過(guò)特殊處理——這種情況會(huì)標(biāo)注“(min X …Sr Prot)”。以下這些詞語(yǔ)的解釋對(duì)挑選合適的抗體很有幫助： Anti - IgG (H + L) 這種抗體能夠和IgG分子的重鏈與輕鏈都產(chǎn)生反應(yīng)，例如，和IgG分子的Fc、F(ab’)2/Fab部分。Anti - IgG (H + L)抗體還可以和其他免疫球蛋白家族發(fā)生反應(yīng)（如IgM和IgA），這是因?yàn)樗械拿庖咔虻鞍锥加邢嗤妮p鏈（κ鏈或者λ鏈）。Anti - IgG (H + L)抗體相比只抗片段的抗體，能夠識(shí)別更多的抗原表位。

Anti - IgG，F(xiàn)c fragment specific

此類抗體能夠與 IgG 重鏈的 Fc 部分發(fā)生反應(yīng)。它們已經(jīng)通過(guò)了 ELISA 檢測(cè)，并且還經(jīng)歷了針對(duì) Fab 片段吸附方面的測(cè)試。在某些特定情形下，為了降低這類抗體與 IgM 或者 IgA 之間的交叉反應(yīng)，還需要對(duì)其進(jìn)行額外的檢測(cè)與處理操作。要是遇到（anti - human，- mouse，- rat）這種情況，它們就會(huì)被描述成 “Anti - IgG，F(xiàn)cγ fragment specific”。

Anti - IgG，F(xiàn)cγ Subclass specific

這類抗體是分別與不同的小鼠 IgG 亞型重鏈的 Fc 部分產(chǎn)生反應(yīng)的。它們經(jīng)過(guò)了 ELISA 檢測(cè)，同時(shí)也完成了針對(duì) Fab 片段、IgM 以及其他小鼠 IgG 亞型的吸附測(cè)試流程。

Anti - IgG，F(xiàn)(ab’)2 fragment specific

這類抗體可與 IgG 的 F (ab’) 2/Fab 部分進(jìn)行反應(yīng)。它們已經(jīng)過(guò) ELISA 檢測(cè)以及 Fc 片段的吸附檢測(cè)。由于它們是和輕鏈發(fā)生反應(yīng)的，所以也會(huì)和那些具有相同輕鏈的其他種類免疫球蛋白（比如 IgM 和 IgA）產(chǎn)生反應(yīng)。

(min X…Sr Prot)

這類抗體不僅經(jīng)過(guò)了相關(guān)檢測(cè)，而且還針對(duì) IgG 以及圓括號(hào)中所標(biāo)注物種的血清蛋白進(jìn)行了吸附處理。當(dāng)有可能因其他物種免疫球蛋白的存在而引發(fā)交叉反應(yīng)時(shí)，一般會(huì)推薦使用這類抗體。不過(guò)，在選擇經(jīng)過(guò)針對(duì)相近物種進(jìn)行吸附處理的抗體時(shí)，務(wù)必要格外留意，因?yàn)榻?jīng)過(guò)這樣的處理后，它們所能識(shí)別的表位數(shù)量會(huì)大幅減少，甚至可能在識(shí)別單克隆抗體方面的能力變得很弱。

ML （Multiple Labeling）

部分抗體標(biāo)注了 ML 字樣，其目的在于著重表明這些抗體除了能夠應(yīng)用于單標(biāo)記實(shí)驗(yàn)之外，還可以用于開展多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。

Step5：選擇所需的探針

熒光團(tuán)：有傳統(tǒng)的以及新型的染料可供選擇，其中包括 Alexa Fluor? Fluorescent Dyes、花青染料（Cy2、Cy3 以及 Cy5）、DyLight 405、Aminomethylcoumarin Acetate (AMCA)、Fluorescein Isothiocyanate (FITC)、Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate（TRITC）、Rhodamine Red - X (RRX)、Texas Red (TR) 等等。

熒光團(tuán)的選取主要取決于以下幾個(gè)方面：

A. 儀器相關(guān)因素

儀器設(shè)備的情況對(duì)熒光團(tuán)的選擇起著重要作用。具體而言，像是光源的特性、所配備濾片的參數(shù)以及整個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的性能等，都會(huì)影響到最終對(duì)熒光團(tuán)的抉擇。不同的儀器可能對(duì)不同熒光團(tuán)有不同的適配性，只有綜合考慮這些儀器方面的因素，才能選出最為合適的熒光團(tuán)。

B. 多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中對(duì)色彩區(qū)分度的要求

在進(jìn)行多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)不同標(biāo)記色彩區(qū)分程度的要求是選擇熒光團(tuán)的關(guān)鍵考量之一。例如，當(dāng)想要更好地區(qū)分 Alexa Fluor? 488 時(shí)，就需要從色彩特性方面精心挑選與之搭配的其他熒光素。此時(shí)，可以選擇具有短發(fā)射波長(zhǎng)的熒光素 DyLight 405，或者選擇那些具有長(zhǎng)發(fā)射波長(zhǎng)的熒光素，像是羅丹明紅 - X（RRX）、Alexa Fluor? 594 以及 Alexa Fluor? 647 等。通過(guò)這樣合理搭配不同發(fā)射波長(zhǎng)的熒光團(tuán)，能夠在多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中更清晰、準(zhǔn)確地對(duì)不同標(biāo)記對(duì)象進(jìn)行區(qū)分和觀察。

C. 對(duì)靈敏度的要求

靈敏度也是決定熒光團(tuán)選擇的重要因素。不同的熒光團(tuán)在發(fā)光亮度等體現(xiàn)靈敏度的方面存在差異。比如，Alexa Fluor? 488 相較于 FITC 而言，其發(fā)光亮度更高，也就意味著在對(duì)靈敏度有較高要求的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景中，Alexa Fluor? 488 可能會(huì)是更優(yōu)的選擇。

Biotin - SP（長(zhǎng)連接的）

Biotin - SP 是 Jackson 所采用的一種命名方式，用于指代其與耦聯(lián)蛋白之間具備長(zhǎng)連接特性的生物素。在開展酶免疫實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，如果使用的是 Biotin - SP 耦聯(lián)的抗體，相較于那些沒(méi)有采用長(zhǎng)連接生物素標(biāo)記的抗體，其在靈敏度方面會(huì)有十分顯著的提升。這種提升能夠讓實(shí)驗(yàn)在檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)時(shí)更加精準(zhǔn)、有效，從而為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性提供有力保障。

酶

Jackson 為用戶提供了兩種不同類型的酶耦聯(lián)物，分別是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）和堿性磷酸脂酶。

其中，HRP 耦聯(lián)物是依據(jù) Nakane 和 Kawaoi 所提出的方法來(lái)進(jìn)行制備的。這種過(guò)氧化物酶耦聯(lián)物在免疫組化、Western blotting 以及 ELISA 等諸多實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域中都有著極為廣泛的應(yīng)用。

而堿性磷酸脂酶耦聯(lián)物則是通過(guò)經(jīng)過(guò)優(yōu)化的 Avremeas 方法制備而成的復(fù)合物，它具備高有效濃度以及高分子量的特點(diǎn)。正是由于這些特性，使得該酶耦聯(lián)物具有較高的靈敏度，尤其適合應(yīng)用于像 ELISA 和 Western blotting 這類固相的免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，能夠在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中更為精準(zhǔn)地檢測(cè)出相關(guān)的目標(biāo)物質(zhì)，從而為實(shí)驗(yàn)研究提供可靠的數(shù)據(jù)支持。

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