| 方法一，以牛胰臟為原料的提到法 |
| 浸取從新宰殺牛（宰后１h內(nèi)）取出胰，除去脂肪，結(jié)締組織等雜物，迅速浸入預(yù)冷的硫酸（0.125mol | L）中，迅速冷卻，在０ 0左右保存，待用。從酸中取出，切碎并投入絞肉機(jī)中，絞碎制成胰漿，然后投入２倍于胰量的冷硫酸（0.125mol | L）溶液中，不斷攪拌下，在冷室中浸?。玻磆，過濾。濾餅用１倍于胰量的冷硫酸（0.125mol | L）同法浸取，合并２次濾液。 |
| 牛胰臟H2SO4(冷)；０2；２４h; 2次→浸取浸取液 |
| 分級(jí)鹽析、結(jié)晶每升浸取液加硫酸銨242g，攪拌，使成４０％飽和度，冷室靜置過夜，次日過濾，在每升濾液中再加硫酸銨205g，攪拌，使?jié)舛仍黾又?0％飽和度，同樣冷室靜置過夜。過濾，濾餅用３倍于濾餅質(zhì)量的冷水溶解，待溶解后，再同上法重復(fù)加硫酸銨至４０％和７０％飽和度分級(jí)鹽析。取兩次硫酸銨７０％飽和度鹽析所得濾餅，用１.5倍適量冷水溶解，并加0.5倍于濾餅質(zhì)量的飽和硫酸溶液，用氫氧化鈉（５mol | L）調(diào)節(jié)Ph至５，在２５0C靜置保溫48h，即有針狀結(jié)晶（糜蛋白酶原料粗品）析出，過濾，母液再以硫酸（2.5mol | L）調(diào)節(jié)Ph3，同上法重復(fù)加入硫酸銨使達(dá)70％飽和度，置冷室過夜，次日過濾，收集濾餅，得胰蛋白酶粗制品。 |
| 浸取液^({NH4)2SO4→分級(jí)鹽析沉淀H2O;(NH4)2SO4→Ph5;結(jié)晶 |
| →糜蛋白酶組織→濾液Ph3;(NH4)2SO4→胰蛋白酶原粗品 |
| 溶解、分級(jí)鹽析取胰蛋白酶原粗制品用冷蒸餾水溶解，用硫酸（2.5mol | L）調(diào)節(jié)Ph3左右（每1L蒸餾水加硫酸銨210g）放置于冰箱過夜。次日，吸取上層清液，加入少量硅藻土過濾至清。沉淀用水溶解，并在攪拌下加入490～735g硫酸銨使其濃度達(dá)40％飽和度，置于冰箱1h。過濾至清，合并2次濾液，加入等體積飽和硫酸銨溶液，達(dá)70％飽和度，置冰箱過夜。次日過濾，濾餅加入酸性飽和硫酸鎂溶液靜置1min，抽濾，待濾液開始流出，將漏斗剩余的硫酸鎂溶液傾去，，抽濾至干，即得胰蛋白酶原。 |
| 胰蛋酶原料粗品H2O;Ph3→溶解2次→(NH4)2SO4→分級(jí)鹽析胰蛋白酶原沉淀 |
| 活化取胰蛋白酶原沉淀用4倍量冷鹽酸（0.005mol | L)溶解，加入2倍量氯化鈣（1mol | L）及5倍量冷Ph8硼酸緩沖液和適量冷蒸餾水，最終使溶液總體積為濾餅重量的20倍，此時(shí)Ph應(yīng)在7.5左右，最后加入濾餅重1％的結(jié)晶胰蛋白酶活化劑（活力在250U、mg以上），攪拌均勻，置冰箱中進(jìn)行活化72h以上，得活化液。 |
| 胰蛋白酶原沉淀CaCl2;硼酸緩沖液→胰蛋白酶；活化液 |
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| 合成工藝與制法二 |
| 以牛胰為原料，首先制得胰蛋白酶原，活化后經(jīng)硫酸銨分級(jí)沉淀，再經(jīng)重結(jié)晶、透析的產(chǎn)品。 |
| 合成工藝與制法三 |
| 由豬或牛的胰腺抽提而得。 |
| 參考質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)一 |
| 見160酶制劑。 |
| 參考質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)二 |
| 酶活力 4000苯甲酰精氨酸乙酯(BAEE) U/mg； 1500 BAEEU/mg (單位定義：25℃，pH=8.0條件下每分鐘使254nm處吸光度增加0.001的酶量為1U)，并檢測(cè)干燥失重、灼燒殘?jiān)软?xiàng)均合格。 |
| 參考質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)三 |
| 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | | 效價(jià)/（單位/mg) | ≥2500/糜蛋白酶/(單位/2500) | <50 | | 酸堿度（Ph值）（2mg/ml) | 5.0～7.0/單位胰蛋白酶 | | 溶液的澄清度/澄清/干燥失重/% | ≤5.0 | | [10mg | ml(0.9%NaCl)] | | 注射液中國(guó)藥典2000年版735頁 | | 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | | 效價(jià) | 為標(biāo)示量的85.0％～120.0％ | 無菌、符合規(guī)定 | | 酸度（pH值） | 5.0～7.0 | 其他、符合注射有關(guān)規(guī)定 | | 干燥失重 | ≤8.0％ |
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