背景及概述^[1]

羥基甲硝唑?yàn)榧紫踹虻拇x物。甲硝唑?qū)儆谙趸溥蝾?lèi)藥物，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，常作為驅(qū)除動(dòng)物體內(nèi)寄生蟲(chóng)的藥物，加入動(dòng)物飼料后，造成雞蛋中甲硝唑的殘留。由于甲硝唑?qū)θ梭w有多種毒副作用，尤其是具有潛在致癌性和致遺傳性變異作用，而且甲硝唑進(jìn)入人體后能快速分布于全身，因此對(duì)雞蛋中甲硝唑及其代謝產(chǎn)物殘留的檢驗(yàn)非常必要。

目前甲硝唑及其代謝物含量測(cè)定方法大多采用液相色譜法或液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，國(guó)家現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)方法中采用固相萃取法、GPC法進(jìn)行樣品預(yù)處理或采用內(nèi)標(biāo)法定量，過(guò)程繁瑣，成本較高。

檢測(cè)^[1]

方法1：雞蛋中甲硝唑及其代謝物殘留量的測(cè)定方法：

（1）提?。悍Q取雞蛋5g，置于離心管中，加入乙腈10mL，加入無(wú)水硫酸鈉5g，渦旋混勻，10000轉(zhuǎn)/分，離心5min；取上層溶液，加入10mL正己烷，渦旋10000轉(zhuǎn)/分，離心5min，下層溶液待凈化。

（2）凈化：取上述溶液5mL，加載到PRIMEHLB固相萃取柱（200mg，6cc），保持一秒一滴流速，收集全部流出液。

（3）濃縮：取4.0mL流出液氮?dú)獯蹈桑尤?.0mL0.1%甲酸水-甲醇（體積比50：50）溶解殘?jiān)?，過(guò)0.2μm微孔濾膜，上LCMSMS測(cè)試。

（4）測(cè)定：采用液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，其中色譜柱為AcqμityBEHC（2.1mm*5mm，1.7μm），柱溫：35℃，進(jìn)樣量1μl，流動(dòng)相：溶劑A為0.1%甲酸水，溶劑B為乙腈，梯度洗脫。

（5）測(cè)量結(jié)果：通過(guò)以上步驟測(cè)得雞蛋中甲硝唑及羥基甲硝唑的含量低于0.5μg/kg。

方法2：蜂王漿中硝基咪唑類(lèi)藥物殘留量的方法，尤其涉及采用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測(cè)定蜂王漿中羥基甲硝唑、2-甲硝咪唑、羥基二甲硝咪唑、甲硝唑、二甲硝咪唑、洛硝噠唑、氯甲硝咪唑、苯硝咪唑、羥基異丙硝唑和異丙硝唑等硝基咪唑類(lèi)藥物殘留量的方法。

同時(shí)測(cè)定蜂王漿中多種硝基咪唑類(lèi)藥物殘留量的檢測(cè)方法，本發(fā)明采用甲醇沉淀蛋白，提取，再采用HLB固相萃取小柱和C18固相萃取小柱凈化，采用色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測(cè)定。本發(fā)明具有專(zhuān)屬性強(qiáng)、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確的特點(diǎn)，不僅測(cè)定硝基咪唑原藥還包括一些代謝產(chǎn)物，方法的測(cè)定低限10μg/kg，測(cè)定低限滿足目前國(guó)內(nèi)外對(duì)蜂王漿中硝基咪唑類(lèi)藥物殘留量的要求?；厥章史秶鸀?0.7%~105.0%；相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于12.7%。

主要參考資料

[1] CN201811088112.1雞蛋中甲硝唑及其代謝物殘留量的測(cè)定方法

[2] CN200910099612.X同時(shí)測(cè)定蜂王漿中多種硝基咪唑類(lèi)藥物殘留量的檢測(cè)方法