背景[1-7]
Bax Rabbit Monoclonal Antibody（Bax兔單克隆抗體）是將Bax作為抗原對(duì)兔進(jìn)行免疫后篩選出只產(chǎn)生的Bax抗體的B淋巴細(xì)胞，再將B細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)與骨髓瘤雜交然后篩選出只分泌Bax抗體的雜交瘤細(xì)胞，最后通過層析柱純化制的高純度的Bax抗體兔單克隆抗體。Bax(Bcl-2 associated X protein)是Oltvai等于1993年發(fā)現(xiàn)的一種與Bcl-2共沉淀的蛋白質(zhì),它與Bcl-2蛋白具有部分同源性,隸屬于Bcl-2家族,是一種重要的細(xì)胞凋亡促進(jìn)基因。它的表達(dá)產(chǎn)物與Bcl-2蛋白結(jié)合為異源二聚體,調(diào)控Bcl-2的活性,抑制了Bcl-2的抗凋亡作用,是Bcl-2家族調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵點(diǎn)。
研究表明Bax蛋白往往在乳腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌等腫瘤組織中低表達(dá)。新近的報(bào)道提出,HCCR-2通過多種渠道使P53基因的活性喪失,抑制其下游基因Bax的表達(dá),并在惡性腫瘤的生物學(xué)進(jìn)程中發(fā)揮了重要的作用,細(xì)胞凋亡的發(fā)生需要一個(gè)專門的蛋白質(zhì)水解酶系統(tǒng),即叫Caspase(天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶)的蛋白酶家族。
Caspases通常以無(wú)活性的酶原形式存在于細(xì)胞中,在細(xì)胞凋亡信號(hào)刺激下,Caspases重新組裝成含有兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基的成熟四聚體活性形式?；罨腃aspases參與一系列蛋白質(zhì)的降解作用,最終導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。通常有兩條主要途徑激活Caspases:一條是通過細(xì)胞表面死亡受體途徑,例如特異性配體結(jié)合的Fas等腫瘤壞死因子(TNF)家族,導(dǎo)致Caspase-8的激活,Caspase-8再依次激活下游的效應(yīng)Caspase,如Caspase-3,-6,和-7。
另一條是線粒體途徑,細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞凋亡信號(hào)觸發(fā)線粒體釋放cytochrome c,隨后cytochrome c與胞漿中的凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)結(jié)合,后者募集Caspase-9并誘導(dǎo)其加工和激活。線粒體外膜通透性的改變和cytochrome c的釋放受Bcl-2家族蛋白質(zhì)的調(diào)節(jié),Bcl-2家族中促凋亡蛋白質(zhì)分子Bax和Bak可做特定的蛋白質(zhì)釋放通道。
細(xì)胞凋亡受多種基因調(diào)節(jié),在參與細(xì)胞凋亡的一系列凋亡調(diào)節(jié)基因中Bcl-2基因及其同一家族的Bax基因是重要的凋亡調(diào)控基因,被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡調(diào)控的最后共同通路之一。Bax/Bcl-2以及Survivin是細(xì)胞凋亡通路上的重要調(diào)控基因,TGF-β與FGF信號(hào)通路中也可以觀察到上述基因表達(dá)的改變。研究表明抑制Bcl-2、Survivin基因或者增強(qiáng)Bax基因表達(dá)均可有效抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),明顯增強(qiáng)放療或化療對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。
應(yīng)用[8][9]
Bax兔單克隆抗體可用于癌癥中Bax表達(dá)的臨床基礎(chǔ)研究：
人宮頸癌基因(Human cervical cancer oncogenes,HCCRs)是從宮頸癌組織及細(xì)胞系中篩選得到的,并且發(fā)現(xiàn)其在宮頸癌及宮頸癌細(xì)胞系中高表達(dá)。HCCRs定位于人染色體的12q,編碼兩種蛋白HCCR-1和HCCR-2。目前的多項(xiàng)科研成果顯示HCCR-1與多種惡性腫瘤相關(guān),它除了在宮頸癌中高表達(dá)外,在其它腫瘤如肝癌、卵巢癌、食管癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、腎癌及白血病中亦高度表達(dá),甚至有研究表明HCCR-1可以作為肝癌及乳腺癌診斷的標(biāo)志物。
通過檢測(cè)HCCR-1及Bax在人乳腺癌組織、癌旁正常組織及乳腺腺病組織中的表達(dá)差異,檢測(cè)下調(diào)HCCR-1表達(dá)對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞中Bax表達(dá)變化及對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖、凋亡的影響,分析HCC R-1及Bax的表達(dá)與人乳腺癌臨床病理學(xué)因素間的相關(guān)性,對(duì)HCCR-1及Bax表達(dá)與乳腺癌發(fā)展、侵襲以及轉(zhuǎn)移的聯(lián)系以及潛在的分子生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行初步研究。
HCCR-1在乳腺癌組織中表達(dá)高于癌旁正常組織及乳腺腺病組織,而Bax在乳腺癌組織中表達(dá)低于癌旁正常組織及乳腺腺病組織；抑制HCCR-1基因的表達(dá)對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞株的凋亡有促進(jìn)作用,而對(duì)其增殖有抑制作用,并且與Bax基因在MCF-7細(xì)胞株中的表達(dá)負(fù)相關(guān)。HCCR-1的過量表達(dá)與乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移、ER表達(dá)、組織學(xué)分級(jí)及pTNM臨床病理分級(jí)相關(guān),而與患者性年齡、PR表達(dá)及腫瘤大小無(wú)關(guān)；Bax的過量表達(dá)與乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移、腫瘤大小相關(guān),而與患者性年齡、ER表達(dá)、PR表達(dá)、組織學(xué)分級(jí)及pTNM臨床病理分級(jí)無(wú)關(guān)。
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