簡述
N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸 1-芐酯（Boc-Glu-OBzl）的分子式為C17H23NO6，分子量為337.37，常溫常壓下表現(xiàn)為白色固體粉末，可溶于氯仿、甲醇等有機(jī)溶劑。該物質(zhì)是以L-谷氨酸為基本骨架的氨基酸衍生物，其結(jié)構(gòu)中的叔丁氧羰基作為氨基的重要保護(hù)基團(tuán)，在有機(jī)合成如固相肽合成 (SPPS)中已有廣泛應(yīng)用，其脫保護(hù)是通過三氟乙酸來實現(xiàn)的，這種方法具有反應(yīng)時間短，產(chǎn)率高和適用范圍廣等優(yōu)點[1]。
理化性質(zhì)
密度: 1.198 g/cm3
熔點：95.0-99.0°C
沸點: 522.6℃ at 760 mmHg
閃點: 269.859℃
應(yīng)用
關(guān)于N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸 1-芐酯的應(yīng)用報道并不多，我們探究N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸 1-芐酯的應(yīng)用價值，可將范圍擴(kuò)大至其上下游物質(zhì)，例如未經(jīng)BOC基團(tuán)保護(hù)的L-谷氨酸 1-芐酯。以聚丙烯酰胺(PAM)為大分 子引發(fā)劑，采用開環(huán)聚合方法，在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中引發(fā)L-谷氨酸 1-芐酯環(huán)內(nèi)酸酐(BLG-NCA)可聚合合成兩親性聚丙烯酰胺/聚L-谷氨 酸芐酯接枝共聚物(PAM-g-BLG)。用芘作熒光探針，研究該共聚物膠束的形成及其臨界膠 束濃度(cmc)，利用動態(tài)光散射(DLS)和透射電鏡(TEM)研究膠束的粒徑分布和形態(tài)。結(jié)果表明，PAM能夠引發(fā)BLG-NCA開環(huán)聚合得到接枝 共聚物，在一定條件下接枝共聚物能夠形成球形的穩(wěn)定膠束，cmc值和膠束粒徑隨著共聚物中疏水性聚L-谷氨酸芐酯(PBLG)鏈段含量的增加而減小[2]。
有關(guān)研究
為在大腸埃希菌中表達(dá)重組鱟血G因子，并檢測其酶活性。根據(jù)大腸埃希菌偏好性優(yōu)化G因子成熟肽編碼序列，將G因子α亞基及β亞基克隆至原核表達(dá)載體pET32a-sumo上，分別構(gòu)建pET32a-sumo/factorG-α及pET32a-sumo/factorG-β原核表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化E. coli BL21(DE3)，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)。產(chǎn)物經(jīng)Ni-NTA親和層析，SUMO蛋白酶切割融合伴侶，獲得重組目的蛋白factorG-α及factorG-β。將二者等摩爾質(zhì)量重組獲得復(fù)合物G，以包含N-叔丁氧羰基-L-谷氨酸 1-芐酯片段的化合物Boc-Glu-(OBzl)-Gly-Arg-MCA為熒光底物檢測其酶活性。結(jié)果經(jīng)PCR及測序鑒定，重組質(zhì)粒pET32a-sumo/factorG-α及p ET32a-sumo/factorG-β構(gòu)建正確，表達(dá)蛋白均以包涵體的形式存在沉淀中，表達(dá)量占菌體總蛋白的30%及45%。純化的factorG-α及factorG-β蛋白相對分子質(zhì)量約為74 000和31 000，每1 L LB培養(yǎng)基酶切回收蛋白分別為0.7和1.7 mg。factorG-α及factorG-β蛋白與熒光底物幾乎不反應(yīng)，而復(fù)合物G可與熒光底物反應(yīng)產(chǎn)生較高的熒光強(qiáng)度。上述實驗即表明成功表達(dá)了具有酶活性的鱟血G因子，為進(jìn)一步探討鱟血G因子的生物學(xué)功能及新型真菌感染檢測試劑盒開發(fā)奠定了基礎(chǔ)[3]。
參考文獻(xiàn)
[1]張敏杰,袁修華,馬麗,等.硅膠催化的選擇性去除N-Boc保護(hù)基[J].高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報, 2007, 28(012):2330-2332.DOI:10.3321/j.issn:0251-0790.2007.12.042.
[2]吳秋華,魏天柱,梁芳,等.聚丙烯酰胺/聚L-谷氨酸芐酯接枝共聚物的合成及其膠束制備[J].高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報, 2008, 29(8):5.DOI:10.3321/j.issn:0251-0790.2008.08.029.
[3]吳尚,黃慧,余華軍,等.鱟血G因子的原核表達(dá)[J].中國生物制品學(xué)雜志, 2019(9):5.DOI:10.13200/j.cnki.cjb.002764.