背景[1-7]
DNA甲基化修飾試劑盒作為新一代的亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)換工具，BisulFlash DNA修飾試劑盒提供了化的緩沖液配方和試劑，能對DNA樣品進行超快速的亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)換處理。利用試劑盒中即時可用的轉(zhuǎn)換混合溶液，能在整個實驗中一直維持DNA的變性狀態(tài).作為本公司的專利溶液，它能使亞硫酸氫鈉快速地地所有胞嘧啶轉(zhuǎn)換為尿嘧啶。
混合溶液中含本公司特有的DNA保護劑，能阻止亞硫酸氫鹽處理過程中DNA的化學和熱降解.無毒的已修飾DNA俘獲緩沖液能將DNA牢牢的結合在柱子的濾膜上，這樣就能放心地洗滌DNA上的亞硫酸氫鈉和鹽離子.被修飾的DNA隨后可以被洗脫下來，儲存在-20℃兩個月以上。
DNA甲基化修飾作為一種重要的表觀遺傳修飾,能通過影響染色質(zhì)結構,DNA構象、穩(wěn)定性以及與蛋白質(zhì)相互作用方式等,起到調(diào)控基因表達的作用。在正常的生理條件以及一些疾病發(fā)生過程中均起著重要作用。DNA甲基化是一種常見的表觀遺傳修飾,由DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNA methyl-transferase,Dnmt)催化,以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作為甲基供體而發(fā)生反應。
催化反應有3類類型,包括將腺嘌呤轉(zhuǎn)變?yōu)镹-甲基腺嘌呤、將胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)镹-甲基胞嘧啶以及將胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)镃-甲基胞嘧啶。原核生物中這3種類型均存在,但是在高等真核生物中只存在第3種類型,即將胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)變?yōu)?-甲基胞嘧啶(5mC)。近些年來,表觀遺傳學領域發(fā)展迅速,相關研究方興未艾。
其中一個非常重要的部分就是DNA甲基化修飾。目前通用的檢測方案是利用亞硫酸鹽修飾的方法。使用亞硫酸鹽將未甲基化的胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)化為尿嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶不受任何影響。然后，再通過設計特異性的甲基化引物，進行MS-PCR擴增或者亞硫酸鹽測序?qū)嶒?，從而達到檢測單個基因甲基化水平的目的。
特點：
1. 生成甲基化陽性對照進行甲基化研究；
2. 包括酶促甲基化的人類基因組DNA和所有修飾元件；
3. 敏感性高，待測DNA中5-甲基胞嘧啶分布極不均衡也可檢測。
4. 適用于各種樣本類型。
5. 轉(zhuǎn)化效率高，在3小時內(nèi)完成富含GC的DNA的完全轉(zhuǎn)化。
6. 獨特的保護劑限度地避免DNA降解，保障了后續(xù)的檢測實驗的需求。
7. 優(yōu)化的緩沖液體系能限度的提高處理后的DNA回收效率。
應用[8]
DNA甲基化修飾試劑盒可用于DNA甲基化相關疾病的診斷：
針對腫瘤表觀遺傳學機制研究的最終目的是為了應用于臨床診斷及預防治療。DNA甲基化和MicroRNA在診斷方面的研究已經(jīng)趨于成熟,Fujiwara等研究表明5個基因血清游離DNA甲基化譜在診斷早期肺癌方面特異性和陽性預測值分別為85%和75%,同樣眾多研究表明MicroRNA表達譜可應用于乳腺癌的病理分型(如雌孕激素受體狀態(tài)、腫瘤分期、腫瘤轉(zhuǎn)移及Her2狀態(tài)等)。
參考文獻
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