背景[1-6]
兔多克隆抗體制備是用小分子、多肽、修飾多肽、蛋白、融合蛋白、修飾蛋白等作為抗原刺激兔機(jī)體，產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng)，由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。一般而言，抗體按靶位點(diǎn)不同主要分為單克隆抗體和多克隆抗體，由多個(gè)B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的，受到多種抗原決定簇刺激并可以與多種抗原表位結(jié)合的抗體就是多克隆抗體?？乖袃蓚€(gè)基本特性，即抗原性和免疫原性。
有抗原性的物質(zhì)不一定有免疫原性，所以由此引出半抗原和完全全抗原，半抗原必須經(jīng)過經(jīng)過一定的改造（偶聯(lián)蛋白載體BSA，OVA或者HSA等大分子物質(zhì)）方能成為完全。一般而言完全抗原分子量越大（大于10KDa），結(jié)構(gòu)越復(fù)雜引起免疫反應(yīng)的能力也就越強(qiáng)?？贵w就是能與特異性抗原結(jié)合的免疫球蛋白，抗體一般分為多克隆抗體和單克隆抗體，多克隆抗體能與抗原的多個(gè)表位結(jié)合。
兔多克隆抗體制備一般制備流程：①制備抗原；②選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；③動(dòng)物免疫；④試取血進(jìn)行測(cè)試，看看是否成功免疫；⑤如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清；⑥純化出抗體；⑦鑒定抗體，包括純度以及特異性。
兔多克隆抗體優(yōu)勢(shì)為：
1.制備體系成熟
2.抗兔二抗產(chǎn)品豐富，商業(yè)化好，適合檢測(cè)
3.制備成本相對(duì)低廉
應(yīng)用[7][8]
兔多克隆抗體制備可用于小分子、多肽、修飾多肽、蛋白、融合蛋白、修飾蛋白檢測(cè)中二級(jí)抗體制備。
一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗體，包括變性—抗性的表位，所以，在深固定的樣本中也會(huì)很好地發(fā)揮效應(yīng)，在石蠟包埋組織切片的染色中，多克隆抗體最常選用。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的不同需要，多克隆抗體應(yīng)用于相應(yīng)抗原的標(biāo)記。
此外，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，多克隆抗體被用于農(nóng)藥殘留現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)；在臨床應(yīng)用中，多克隆抗體主要用于病原物的檢測(cè)、疾病的診斷及治療，如作為蛋白類免疫抑制劑用于移植反應(yīng)和自身免疫病的治療。
例如在EB病毒LMP1 C端重組蛋白多克隆抗體的制備和鑒定的實(shí)驗(yàn)中制備EB病毒(EBV)潛伏膜蛋白1(LMP1)C端(187～386)的原核表達(dá)蛋白及其多克隆抗體并檢驗(yàn)其生物學(xué)特性。
參考文獻(xiàn)
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