背景^[1-7]

小鼠單克隆抗體制備是由激活的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的單克隆雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的。小鼠單克隆抗體是最常見最經(jīng)典的單克隆抗體。同時(shí)小鼠也是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中最常見的模式動(dòng)物之一。小鼠單克隆抗體優(yōu)點(diǎn);高度特異性、高度均一性、可快速、大量、連續(xù)生產(chǎn)、應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，涵蓋檢測(cè)治療等多個(gè)領(lǐng)域、制備方案和工具成熟、應(yīng)用前景良好。

雜交瘤技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細(xì)胞而同時(shí)保持兩者的主要特征。這兩種細(xì)胞分別是經(jīng)抗原免疫的免疫動(dòng)物脾細(xì)胞（如小鼠B淋巴細(xì)胞）和具有永生功能的腫瘤細(xì)胞（如小鼠骨髓瘤細(xì)胞）。被特異性抗原免疫的免疫動(dòng)物脾細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞）的主要特征是它的抗體能夠分泌產(chǎn)生結(jié)合抗原特定位置（表位）的抗體，但其自身不能在體外連續(xù)培養(yǎng)，具有永生功能的腫瘤細(xì)胞（骨髓瘤細(xì)胞）則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。

在選擇培養(yǎng)基的作用下，只有由一個(gè)B淋巴細(xì)胞與一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞才能具有持續(xù)培養(yǎng)的能力，形成同時(shí)具備抗體分泌功能和保持細(xì)胞永生性兩種特征的細(xì)胞克隆。理論上，我們認(rèn)為一個(gè)免疫后的B淋巴細(xì)胞只分泌產(chǎn)生一種抗體，而一個(gè)雜交瘤細(xì)胞只包含一個(gè)B淋巴細(xì)胞，所以增值后的雜交瘤細(xì)胞均來自一各克隆，因此產(chǎn)生的抗體就是單克隆抗體。

服務(wù)內(nèi)容：

1、抗原準(zhǔn)備

2、免疫Bal B/C小鼠

3、小鼠抗血清檢測(cè)（ELISA、IHC、IF、WB）

4、血清檢測(cè)結(jié)果合格，進(jìn)行細(xì)胞融合及陽性細(xì)胞株的篩選，亞克隆，建立穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞株，細(xì)胞株保存

5、制備小鼠腹水，抗體純化

6、細(xì)胞株分泌抗體亞型鑒定

抗原要求：

1.蛋白抗原：蛋白量>5mg，濃度＞1mg/ml，純度>85%，分子量>10KDa

2.多肽抗原：多肽量>5mg，純度>95%

應(yīng)用^[8]

1、診斷各類病原體

這是單抗應(yīng)用最多的領(lǐng)域，已有大量診斷試劑商品供選擇。如用于診斷乙肝病毒、丙肝病毒、皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒和各種微生物、寄生蟲感染的試劑等。單抗所具有的靈敏度高、特異性好的特點(diǎn)，使其在鑒別菌種的型及亞型、病毒變異株，以及寄生蟲不同生活周期的抗原性等方面更具獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。

2、腫瘤特異性抗原和腫瘤相關(guān)抗原的檢測(cè)

用于腫瘤的診斷、分型及定位。盡管目前尚未制備出腫瘤特異性抗原的單抗，但對(duì)腫瘤相關(guān)抗原(如甲胎蛋白、腫瘤堿性蛋白和癌胚抗原)的單抗早就用于臨床檢驗(yàn)。隨著淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)的應(yīng)用，許多抗人腫瘤標(biāo)記物的雜交瘤細(xì)胞株已經(jīng)建立，這為腫瘤的早期診斷及其闡明腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，了解腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)活性及其定量研究奠定了基礎(chǔ)。

用抗腫瘤單抗檢查病理標(biāo)本，可協(xié)助確定轉(zhuǎn)移腫瘤的原發(fā)部位。以放射性核素標(biāo)記單抗可用于體內(nèi)診斷，再結(jié)合X-線斷層掃描技術(shù)，可對(duì)腫瘤的大小及其轉(zhuǎn)移灶作出定量診斷。

3、檢測(cè)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志

用于區(qū)分細(xì)胞亞群和細(xì)胞的分化階段。例如檢測(cè)CD系列標(biāo)志，有利于了解細(xì)胞的分化和T細(xì)胞亞群的數(shù)量和質(zhì)量變化，這對(duì)多種疾病診斷具有參考意義。細(xì)胞表面抗原的檢測(cè)，將對(duì)白血病患者的疾病分期、治療效果、預(yù)后判斷等方面有指導(dǎo)作用。組織相容性抗原檢測(cè)是移植免疫學(xué)的重要內(nèi)容，應(yīng)用單抗對(duì)其進(jìn)行位點(diǎn)檢測(cè)可得到更可信的結(jié)果。

4、機(jī)體微量成分的測(cè)定

應(yīng)用單抗結(jié)合其它技術(shù)，可對(duì)機(jī)體的多種微量成分進(jìn)行測(cè)定。如放射免疫分析，即是利用了同位素的靈敏性和抗原-抗體反應(yīng)的特異性而建立起來的方法，它可以測(cè)至10-9～10-12g，使原來難以測(cè)定的激素能夠進(jìn)行定量分析。除了激素，還可檢測(cè)諸多酶類、維生素、藥物和其它生化物質(zhì)。這對(duì)受檢者健康狀態(tài)判斷、疾病檢出、指導(dǎo)診斷和臨床治療均具有實(shí)際意義。

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