背景及概述^[1][2]

荷包牡丹堿類(lèi)屬于異喹啉類(lèi)生物堿，人們對(duì)此類(lèi)化合物的生理活性研究一直比較活躍。荷包牡丹堿具有鎮(zhèn)痛，鎮(zhèn)靜，抗癌及腸道平滑肌解痙作用；已有報(bào)道荷包牡丹堿對(duì)人GLC 細(xì)胞，人子宮癌HeLa 細(xì)胞以及KB 細(xì)胞都有一定的增殖抑制作用，此外荷包牡丹堿對(duì)人肺腺癌細(xì)胞A549具有一定抗腫瘤作用。

結(jié)構(gòu)

應(yīng)用^[1-5]

1）荷包牡丹堿誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞A549 凋亡。

有實(shí)驗(yàn)探討荷包牡丹堿對(duì)人肺腺癌細(xì)胞A549 的增殖抑制作用并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行研究。采用MTT 比色法檢測(cè)荷包牡丹堿在不同濃度及不同時(shí)間對(duì)人肺癌細(xì)胞A549 的增殖抑制作用。利用TUNEL 法探討荷包牡丹堿誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞A549 的凋亡效果；流式細(xì)胞術(shù)( FMC) 測(cè)定荷包牡丹堿對(duì)A549 腫瘤細(xì)胞周期的分布；比色法測(cè)定荷包牡丹堿對(duì)半胱天冬酶( caspase) -3 蛋白活性的影響。

結(jié)果顯示，荷包牡丹堿對(duì)人肺腺癌細(xì)胞A549 增殖抑制作用隨著藥物濃度的升高和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)；荷包牡丹堿對(duì)A549 腫瘤細(xì)胞具有明顯的凋亡效應(yīng)；荷包牡丹堿與A549 腫瘤細(xì)胞作用后，發(fā)生S 期阻滯；荷包牡丹堿促使caspase-3 蛋白活化。荷包牡丹堿能有效抑制人肺腺癌細(xì)胞A549 的生長(zhǎng)，使細(xì)胞周期阻滯在S 期，進(jìn)一步誘導(dǎo)其凋亡，并使caspase-3 蛋白活化。caspase-3 蛋白的激活可能在荷包牡丹堿誘導(dǎo)A549 細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重要作用。

2）荷包牡丹堿對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。

有研究探討荷包牡丹堿對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用及其可能的機(jī)制。采用體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞，MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖情況；Hoechst33258染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化；Western blot法檢測(cè)Bax、Bcl-2和Caspase-3的表達(dá)。

MTT法顯示：不同濃度的荷包牡丹堿作用于胃癌SGC-7901細(xì)胞不同的時(shí)間之后，SGC-7901細(xì)胞呈現(xiàn)時(shí)間及濃度依賴(lài)性的生長(zhǎng)抑制；流式細(xì)胞儀方法顯示：荷包牡丹堿可以促進(jìn)胃癌SGC-7901細(xì)胞的凋亡；行Hoechest33258染色可見(jiàn)細(xì)胞核出現(xiàn)固縮、邊集，形成凋亡小體等凋亡現(xiàn)象；Western blot法檢測(cè)顯示：與對(duì)照組相比，藥物作用后Bcl-2表達(dá)降低，Bax、Caspase-3表達(dá)升高，Bcl-2/Bax比例失調(diào)。結(jié)論荷包牡丹堿在體外對(duì)胃癌細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)具有抑制作用，可促進(jìn)其凋亡，其作用可能與Bcl-2/Bax降低導(dǎo)致Caspase-3活化有關(guān)。 

3）荷包牡丹堿對(duì)哮喘小鼠肺組織α-SMA及氣道重構(gòu)的影響。

有實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察鼻內(nèi)注射γ-氨基丁酸受體(GABAR)特異性拮抗劑荷包牡丹堿對(duì)慢性哮喘模型小鼠肺組織α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth muscle actin，α-SMA)在轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平表達(dá)及氣道重構(gòu)的影響，探討拮抗劑在哮喘氣道重構(gòu)中的治療作用。將BALB/c小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、哮喘模型組、拮抗劑干預(yù)組和激素干預(yù)組，用卵蛋白(OVA)致敏激發(fā)建立小鼠哮喘模型，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)與免疫組化的方法研究肺組織α-SMA的表達(dá)及氣道形態(tài)學(xué)參數(shù)的改變。

因此，哮喘小鼠肺組織α-SMA過(guò)量表達(dá)與哮喘發(fā)生密切相關(guān)，荷包牡丹堿可以抑制慢性哮喘模型小鼠α-SMA的表達(dá)及氣道形態(tài)結(jié)構(gòu)改變，作用與吸入性皮質(zhì)激素相似。提示GABAR通過(guò)上調(diào)α-SMA表達(dá)，促進(jìn)氣道平滑肌收縮及增生，參與氣道重構(gòu)的調(diào)節(jié)。

4）荷包牡丹堿對(duì)小鼠下丘神經(jīng)元反應(yīng)潛伏期的影響。

有研究觀察荷包牡丹堿對(duì)下丘神經(jīng)元聲反應(yīng)潛伏期改變并分析γ-氨基丁酸(GABA)能神經(jīng)元在下丘信息處理中的作用。在13只4～5周齡BALB/c小鼠下丘，觀察并記錄微電泳GABAA受體拮抗劑荷包牡丹堿(bicuculline，methiolide，BMI)對(duì)神經(jīng)元純頻聲反應(yīng)特性的影響。提取特征頻率下潛伏期等特性進(jìn)行分析。結(jié)果共記錄到30個(gè)單單位神經(jīng)元，在BMI作用后40%(n=12)的神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢粷摲谘娱L(zhǎng)，23.3%(n=7)出現(xiàn)特征頻率改變，其中潛伏期延長(zhǎng)的神經(jīng)元中有50%(n=6)伴有特征頻率改變，閾值改變具有線性趨勢(shì)。因此小鼠下丘神經(jīng)元反應(yīng)潛伏期形成受GABA能抑制作用，并通過(guò)側(cè)抑制作用增高神經(jīng)元頻率選擇性。推測(cè)潛伏期變化能從突觸水平反應(yīng)GABA能神經(jīng)元的信息整合作用。

主要參考資料

[1] 荷包牡丹堿誘導(dǎo)人肺腺癌細(xì)胞A549 凋亡及其機(jī)制初探

[2] 荷包牡丹堿對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)的作用及機(jī)制初探

[3] 荷包牡丹堿對(duì)哮喘小鼠肺組織α-SMA及氣道重構(gòu)的影響

[4] 荷包牡丹堿對(duì)小鼠下丘神經(jīng)元反應(yīng)潛伏期的影響

[5] 荷包牡丹堿對(duì)抗γ-氨基丁酸對(duì)伏核痛反應(yīng)神經(jīng)元電活動(dòng)的影響