條件性基因敲除小鼠介紹^[1]

組織特異性的條件性基因敲除小鼠模型指通過基因敲除技術(shù)，使目的基因在特定組織或細(xì)胞中不表達,而在其他組織或細(xì)胞中正常表達的動物模型。

條件性基因敲除小鼠優(yōu)勢與不足^[1]

優(yōu)勢:這種打靶策略能避免全基因敲除可能引起的胚胎致死及表型復(fù)雜等問題,同時因為目的基因只在特定組織中失活,能用于研究該基因在特定組織中的功能,而該基因在其他組織中仍能正常表達; .

不足:設(shè)計時需要對基因進行全面的分析,避免基因敲除導(dǎo)致內(nèi)源性基因的表達下調(diào)或截短蛋白的表達。得到的種系遺傳小鼠模型需要與組織特異性表達重組酶的小鼠交配才能得到組織特異性敲除小鼠,使后續(xù)繁殖時間比全基因敲除小鼠模型至少多交配一代。

條件性基因敲除操作原理^[1]

條件性基因敲除小鼠主要是通過染色體位點特異性重組酶系統(tǒng)來實現(xiàn)的,如Cre-LoxP系統(tǒng)、FLP-Frt系統(tǒng)和Dre-Rox系統(tǒng)等 ,其中最常用的是Cre-LoxP系統(tǒng)。這一系統(tǒng)是在待敲除的一段目的基因序列的兩端各放置一個LoxP序列,得到Floxed ( Flanked by loxP)小鼠。該floxed小鼠在與表達Cre重組酶的小鼠雜交前,目的基因表達完全正常,從而能夠避免全基因敲除可能出現(xiàn)的胚胎致死。而當(dāng)該loxed小鼠與組織特異性表達Cre重組酶的小鼠雜交后,即可獲得目的基因在特定的組織或細(xì)胞中被敲除的小鼠,而該基因在其它組織或細(xì)胞中表達正常。

floxed小鼠如果與不同的Cre重組酶小鼠雜交,可以使目的基因的敲除發(fā)生在小鼠的任一組織或細(xì)胞中。此外,如果與控制Cre重組酶表達的誘導(dǎo)系統(tǒng)相結(jié)合, 還可以使目的基因的敲除發(fā)生在小鼠發(fā)育的任一階段,實現(xiàn)對目的基因表達的時空兩方面調(diào)控。

條件性基因敲除小鼠應(yīng)用^[1]

具有胚胎致死性目的基因的研究;

目的基因在特定組織中的生理或病理功能研究;

藥物的靶標(biāo)確認(rèn);

藥物的毒理學(xué)研究

主要參考文獻

[1] 王晶；董芳芳；李曉鋒；舒冰；施杞；王擁軍；周重建。益氣化瘀方減輕HIF-1α條件性基因敲除小鼠椎間盤退變的研究?！兜谑艑萌珖形麽t(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會論文匯編》2012年。