"Raji細胞：人Burkitt’s淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：Raji細胞由PulvertaftRJV于１９６３年從一位１１歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的，是個人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細胞，為B細胞起源。該細胞中含有EBV，需要在二級生物安全柜中操作；可作轉染宿主。
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：維持細胞濃度在４×１０５/ml-３×１０６/ml；根據(jù)細胞濃度每２-３天補液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：懸浮生長
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞培養(yǎng)相關問題總結：冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂；細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時，是否應馬上去除DMSO？除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外，絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞），在解凍之后，應直接放入含有１０-１５ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題；可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活；培養(yǎng)細胞時應使用５%或１０%CO２？或根本沒有影響？一般培養(yǎng)基中大都使用HCO３-/CO３２-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO３的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO２濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO３含量為每公升３.７g時，細胞培養(yǎng)時應使用１０%CO２；當培養(yǎng)基中NaHCO３為每公升１.５g時，則應使用５%CO２培養(yǎng)細胞。何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素？除于特殊篩選系統(tǒng)中外，一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下，培養(yǎng)基中不應添加任何抗生素。
P 815細胞系相關產(chǎn)品：SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
CL MC/9細胞系相關產(chǎn)品：HFL 1細胞、Walker256-TC細胞、NOR-10細胞
Metastatic Variant-522細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞
CCD966SK細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
L-6 myoblast細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
HeLa 229細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關產(chǎn)品：1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
3T3 L1細胞系相關產(chǎn)品：NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
SW837細胞系相關產(chǎn)品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
MT4細胞系相關產(chǎn)品：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
alpha TC1.6細胞系相關產(chǎn)品：HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
MHHCALL2細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
SNU449細胞系相關產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
CD18/HPAF細胞系相關產(chǎn)品：NB-9細胞、RL95-2細胞、Chinese Hamster Lung細胞
V-79-4細胞系相關產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
RPTEC/TERT 1細胞系相關產(chǎn)品：RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞
NCI-HUT-460細胞系相關產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
Y3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞
RPE1-hTERT細胞系相關產(chǎn)品：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
SW948細胞系相關產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
DH82細胞系相關產(chǎn)品：IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
D-324MED細胞系相關產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
NCIH548細胞系相關產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
NCTC clone 929細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
LUDLU-1細胞系相關產(chǎn)品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
MAC1細胞系相關產(chǎn)品：MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
NCI-H2066細胞系相關產(chǎn)品：Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞
H-2198細胞系相關產(chǎn)品：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
MEG01細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
A-549細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞
NCIH820細胞系相關產(chǎn)品：HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關產(chǎn)品：Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
C-33 A細胞系相關產(chǎn)品：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
MDA-MB 453細胞系相關產(chǎn)品：LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
WC00059細胞系相關產(chǎn)品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
PANC 813細胞系相關產(chǎn)品：HCT GEO細胞、MESSADX5細胞、PM6細胞
IEC 6細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
GM12878細胞系相關產(chǎn)品：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
HEK/293細胞系相關產(chǎn)品：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞
UCLA SO M14細胞系相關產(chǎn)品：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
Y3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞
H1793細胞系相關產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
JURKAT E-61細胞系相關產(chǎn)品：MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞
H1819細胞系相關產(chǎn)品：HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
SK-MEL-31細胞系相關產(chǎn)品：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞
LWnt3A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
MOLT4細胞系相關產(chǎn)品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
38C13細胞系相關產(chǎn)品：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
AMO1細胞系相關產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
NCI-H1975細胞系相關產(chǎn)品：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
HPAF-2細胞系相關產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
HEL 92.1.7細胞系相關產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
G402細胞系相關產(chǎn)品：MOLP2細胞、TE353.SK細胞、PANC403細胞
SK-Col-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
OC-3-VGH細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
T98G細胞系相關產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
H-1792細胞系相關產(chǎn)品：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關產(chǎn)品：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
HCC-1428細胞系相關產(chǎn)品：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
NCI-H2030細胞系相關產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
H1975細胞系相關產(chǎn)品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
HuT 78細胞系相關產(chǎn)品：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
RFL 6細胞系相關產(chǎn)品：BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
NOR-10細胞系相關產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
Hs 606.T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞
TGBC11TKB細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
HCC-1395細胞系相關產(chǎn)品：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
Sf21細胞系相關產(chǎn)品：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞
HANK細胞系相關產(chǎn)品：BJAB-1細胞、MH-S細胞、Colon-26細胞
4-1st細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、SUM 190PT細胞、H1563細胞
Metastatic Variant-522細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2291細胞、TOG細胞、H2444細胞
PL9細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H-69細胞、LCMS細胞、RS4:11細胞
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