"SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過(guò)夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：１.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無(wú)血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞形態(tài)特性：多邊形的
KRCY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細(xì)胞、Ly18細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞
A2780/CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞
COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞
Hs 852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR 983F細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞
HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞
SMMC 7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA293細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞、H2347細(xì)胞
SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
SNU869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞
U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞
MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞
RPMI-7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
MDA-MB-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞
NG-108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、CAL62細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞
H-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
HOP 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞
ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
EAhy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs.27細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞
SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
A 2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞
CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞
McCoy B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU16細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞
H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞
RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞
OV2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
UMC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞
GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞
MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞
PL 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞
OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
38C13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞
NCI-H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞
HuTu 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞
NCI-H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA-7細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞
HS852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
MFE-296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細(xì)胞、H-747細(xì)胞、A375mel細(xì)胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞
CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
NCI-H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA-7細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞
NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞
OSC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL-6細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞
GM06141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-I細(xì)胞、THP 1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞
Hs819T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細(xì)胞、U2OS細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞
NCI-SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞、MH7A細(xì)胞
OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞
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