"SK-MEL-1 Thawing人皮膚黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SK-MEL-1 Thawing人皮膚黑色素瘤細胞系
細胞生長：貼壁
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：維持細胞濃度在１×１０５-２×１０５,每周補液２-３次。
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-MEL-1 Thawing人皮膚黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：球形的
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
ECC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
LA-N-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
Hs821T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
Z-138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
NCI-H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292 clone A141B1細胞、Eph4 1424細胞、P3X63-Ag8.653細胞
LAD2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細胞、OVCA5細胞、Hepatoma-22細胞
CAOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
NCIH661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
HUT125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
SK-MEL-1 Thawing人皮膚黑色素瘤細胞系
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
QGY 7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
T47D:A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞
TK10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
WPMY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TJ905細胞、SNU-C1細胞、KYSE 140細胞
SCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
HLE-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
CHG-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細胞、A375.S2細胞、CL 1-5細胞
B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
Panc 08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞
Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
NRK-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
NCI-SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
E0771細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、BC-3-H-I細胞、kms 11細胞
PL 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
HOMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
SK-MEL-1 Thawing人皮膚黑色素瘤細胞系
SK-N-BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
KPNRTBM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
ketr 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞
SPC-A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
STC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
YH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
HuH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
"