"NCI-H1651 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H1651 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：８傳代，每周換液２次
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機(jī)會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動作要輕，以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H1651 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細(xì)胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞
H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
KU-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞
LS-174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-EC3細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞
CCD-841-CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF (CF-1)細(xì)胞、LS513細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞
mRMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375mel細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞
CBRH7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP100細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞、BT 325細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細(xì)胞、WiDr細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
FM-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞
Kit-225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC8024細(xì)胞、ST486細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞
RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞
MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
SCC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2135細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
BLO11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞
SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞
NCI-H1651 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
KP-N-RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML3細(xì)胞、KAT5細(xì)胞、578T細(xì)胞
SKNBE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
PG13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細(xì)胞、MDST8細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
SCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞
HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞
H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞
MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞
CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞
HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞
H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-449細(xì)胞、COLO679細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞
H-1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞、U343MG細(xì)胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞
THP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-226細(xì)胞、C2C12細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞
RWPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2073細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞、TE3細(xì)胞
HOS-143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL6A/C1細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞、526mel細(xì)胞
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞
AgC11x3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman M3細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞
FU-OV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH526細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞
DMS 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
NCI-H1651 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
A2780-CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.T細(xì)胞、NG10815細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL4細(xì)胞、HT細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞
H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞
Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
NCI H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞
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