"NCI-H1563 Thawing人胚肺細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H1563 Thawing人胚肺細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲(chóng)的污染情況總結(jié)】原蟲(chóng)：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問(wèn)題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：４傳代；每周換液２次。
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們最常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開(kāi)一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不好），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒(méi)有96孔板好掌握，效果沒(méi)有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H1563 Thawing人胚肺細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題，見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開(kāi)始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見(jiàn)，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來(lái)，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題，很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到，雖然通過(guò)其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮鳎傆X(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
NCI-H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：174xCEM.T2細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞、hEEC細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
A2780/CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞
KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞
hTERT-HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-673細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞、NL-20細(xì)胞
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
NL-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細(xì)胞、9L細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞
Human Microglia Clone 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2108細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞、C4-I細(xì)胞
S-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs578Bst細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、H929細(xì)胞
Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞
SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞
QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞
MDA-MB-175-VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞
Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞
EHEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-270細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞、Rh30細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
NCI-H1563 Thawing人胚肺細(xì)胞系
RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
RAW-264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1937細(xì)胞、G361細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
293-GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細(xì)胞、SKES1細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞
293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞
NOMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細(xì)胞、CII細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞
IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞
SKLU01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞
DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞
Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞
BIC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、SW-756細(xì)胞、ONS76細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞
LAPC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSAT細(xì)胞、SNU886細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞
LN 382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞
Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞
SK-N-FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞
CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞
CCD 966 SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細(xì)胞、149PT細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞
Panc 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47-D細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞、Pan02細(xì)胞
AG06814-J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞
138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9724細(xì)胞、A-204細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞
MCF-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞、EB-2細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
HRMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞
NCI-H1563 Thawing人胚肺細(xì)胞系
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞
PC-9/S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細(xì)胞、H-498細(xì)胞、D407細(xì)胞
NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
HLE-SRA-01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞
RIN-m 14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1783細(xì)胞、SHG44細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞
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