"GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長，但時間長之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細(xì)胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細(xì)胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細(xì)胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm.
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的，電擊對細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
P3/X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞
CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞
NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
SCC-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2052細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞
A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
U-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞
HH [Human lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1184細(xì)胞、H-1882細(xì)胞、C2A細(xì)胞
NALM-6-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細(xì)胞、KRCY細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞
Molm 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-cloneD1細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞
DMS-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細(xì)胞、AM38細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞
NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、H1755細(xì)胞
OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞
HuH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-120細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞、M 1細(xì)胞
COS-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞、TE-9細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
RA-FLSs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0044細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、L6細(xì)胞
GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞
Mel624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH847細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
Walker256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞
HEEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞、JCA1細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SY5Y細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞、SB細(xì)胞
HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞
Tu177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞、HPDE細(xì)胞
Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞
HS-940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940-T細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞、HSF2細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞
MBT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞
526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞
NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞
GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
ECGI10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞
CL1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞
SGC-7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
NCM-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細(xì)胞、H-220細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞
Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞
NCIH292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 683T細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞、BRL細(xì)胞
GOS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞
MDA-MB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞
SW1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-16細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞、L細(xì)胞
HPAF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞
WEHI164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細(xì)胞、BL2141細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞
GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
COR-L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細(xì)胞、MC/9細(xì)胞、LM8細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞
32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞
RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞
NCIH1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMSC細(xì)胞、D341細(xì)胞、T. T細(xì)胞
Panc 3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞
PANC 203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE4細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞
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