"EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞
T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
SP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
AN3-CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細(xì)胞、GM16136細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
SKUT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細(xì)胞、Kit225細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞
NIH-OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251 MG細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞、High-5細(xì)胞
HA1800細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUSMC細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞
SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞、HB611細(xì)胞
P3-x63-Ag8 653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞、MV3細(xì)胞
ATDC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞
Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
SKML-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞
SF-767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞、CT 26細(xì)胞
EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
COLO394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：373 MG細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞、RGM1細(xì)胞
D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞
Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞
Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
FL62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
NCIH146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H64細(xì)胞、A375SM細(xì)胞、293-F細(xì)胞
IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞
SW626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞
OCI-Ly03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細(xì)胞、A-253細(xì)胞、MC/9細(xì)胞
HT-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
SUDHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-119細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞、COS1細(xì)胞
C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32細(xì)胞、PIG1細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞
Line 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細(xì)胞、F442-A細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞
Cor L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1573細(xì)胞、SW-900細(xì)胞、CV1細(xì)胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細(xì)胞、H548細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞
Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞
H-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細(xì)胞、H1155細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
TMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞
BLO11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞
mIMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞
SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
Hs852T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA871細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞
EC-GI-10 Thawing人食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞
KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞
KPL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-940-T細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞、MV 3細(xì)胞
FHs 74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細(xì)胞、H-510細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞
HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞
NB19-RIKEN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MODE-K細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞
H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞
T9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801D細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞
CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞
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