"NH-6 Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NH-6 Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代；每周換液２-３次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NH-6 Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
IALM細胞系相關產(chǎn)品：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
TGW-nu-1細胞系相關產(chǎn)品：Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
NFS-60細胞系相關產(chǎn)品：Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
B-95-8細胞系相關產(chǎn)品：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞
P-19細胞系相關產(chǎn)品：HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞
746T細胞系相關產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞
ABC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
LA-795細胞系相關產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
MOLT 3細胞系相關產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
CAL33細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
Walker256細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
HuH-1細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
Mono Mac 6細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
RSC96細胞系相關產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
MDA-MB453細胞系相關產(chǎn)品：CCD966SK細胞、HEC-1-B細胞、B16/BL6細胞
HeLa 229細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細胞、CHO-S細胞、BALL-1細胞
BEL7404細胞系相關產(chǎn)品：Detroit562細胞、LNCaP FGC細胞、SACC83細胞
SCL-2細胞系相關產(chǎn)品：BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
NCIH2122細胞系相關產(chǎn)品：LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
TALL-104細胞系相關產(chǎn)品：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
H-2110細胞系相關產(chǎn)品：RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞
H-2110細胞系相關產(chǎn)品：RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞
CTLL-2細胞系相關產(chǎn)品：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞
LS-1034細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2107細胞、OsACL細胞、A 549細胞
LA-N-1細胞系相關產(chǎn)品：HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
HCC1954BL細胞系相關產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
NH-6 Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
MCCAR細胞系相關產(chǎn)品：TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞
NCIH889細胞系相關產(chǎn)品：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
NCI-H2591細胞系相關產(chǎn)品：AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
HFE-145細胞系相關產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
EL 4細胞系相關產(chǎn)品：L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞
JIMT-1細胞系相關產(chǎn)品：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
Kit-225細胞系相關產(chǎn)品：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞
NCIH2029細胞系相關產(chǎn)品：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
HuPT4細胞系相關產(chǎn)品：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
EVSA/T細胞系相關產(chǎn)品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
HEL-1細胞系相關產(chǎn)品：SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞
ACC-M細胞系相關產(chǎn)品：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
NCI-H446細胞系相關產(chǎn)品：WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
KNS-62細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
L-929細胞系相關產(chǎn)品：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
Hs746-T細胞系相關產(chǎn)品：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
H345細胞系相關產(chǎn)品：NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
J 82細胞系相關產(chǎn)品：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
MDA-436細胞系相關產(chǎn)品：RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
TK-10細胞系相關產(chǎn)品：Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞
Panc813細胞系相關產(chǎn)品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
SCCVII細胞系相關產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
HL60細胞系相關產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
CTLL2細胞系相關產(chǎn)品：HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞
PL-12細胞系相關產(chǎn)品：MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
NCI-H1993細胞系相關產(chǎn)品：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
CT26-clone 25細胞系相關產(chǎn)品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
PC-3細胞系相關產(chǎn)品：Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
HMy2.CIR細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
SKNBE2細胞系相關產(chǎn)品：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞
SNU-119細胞系相關產(chǎn)品：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
INS-1細胞系相關產(chǎn)品：BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞
NH-6 Thawing人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
UCLA NPA-87-1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
ASPC1細胞系相關產(chǎn)品：HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
NCI-H1993細胞系相關產(chǎn)品：PTK 1細胞、HuH-6細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞
Colo-201細胞系相關產(chǎn)品：NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
J111細胞系相關產(chǎn)品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
NCI-H1915細胞系相關產(chǎn)品：NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
KALS1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞
Vero E-6細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
BHK21細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
T 24細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
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