"GOTO Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
GOTO Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
接收細(xì)胞相關(guān)問題:如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞,T25及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在37度過夜,血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱),干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升華,請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境,同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁,此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞,可以收集上清后離心(1200rpm,5min)后,將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中,由于不斷震蕩及環(huán)境不適,可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡,從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下,平衡后,貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可;懸浮細(xì)胞可以離心(1000rpm,3min)收集細(xì)胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:10^4 cells/ml
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GOTO Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液;2)吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?!痉盅b稀釋細(xì)胞操作】1)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長,傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2~3個(gè)培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞2小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞
ZR7530細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2-BBE細(xì)胞、293-F細(xì)胞、H-1092細(xì)胞
HCC-1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B/C3T3細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞
DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
NCIH2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細(xì)胞、KY-50細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞
Mink Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1915細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
X63-AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-5細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞、H-157細(xì)胞
H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2171細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Skin 1細(xì)胞、C6661細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞
PANC3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-B細(xì)胞、PLA802細(xì)胞、VP267細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T241細(xì)胞、1301細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞
MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞
KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7405細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、TE-7細(xì)胞
SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞
SKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGMC細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞、L cells細(xì)胞
GOTO Thawing人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
KLN205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細(xì)胞、ES-2細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞
SK-MES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞、Simpson細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
H-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞、GB-1細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
HCC0202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞
P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞
CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
TGBC-11-TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7951細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE270細(xì)胞、H774細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss3T3細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞
NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞
HRCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
Human Embryo Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞
Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞
JB-6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞
NCI-H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/0HK細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞
UMUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、H-2029細(xì)胞
B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞、H1755細(xì)胞
Hs 888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞
SKNEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、786-O細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
IHH-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞
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H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
A427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoN細(xì)胞、SW 954細(xì)胞、RH-35細(xì)胞
A427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoN細(xì)胞、SW 954細(xì)胞、RH-35細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞
LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
MC57G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞、HT144細(xì)胞
A9 (Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
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