"FHC Adherent人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:胎兒;結(jié)腸;自發(fā)永生;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
FHC Adherent人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
A 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞、MSB1細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞
TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞
PANC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC-6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
FHC Adherent人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞
KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
MDA-MB-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2444細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、HS-729細(xì)胞
KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞
LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞
Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞、HEC251細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞
SKNBE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PGBE1細(xì)胞、C26細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
KU812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞
FHC Adherent人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
HT-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞
OKa-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞
BLO11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
CCD 966 SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780 CP70細(xì)胞、149PT細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-IIIa細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞
DU_145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC-007細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞
CHP-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM-1細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞
WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
NFHIOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM356細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞
OCM-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
CORL279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
SUM190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801C細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞
HS-445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC.3細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
A-375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細(xì)胞、H35細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞
FHC Adherent人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系
NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
WM266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-39細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞
AMJ2C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 2細(xì)胞、BE2C細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
MDA-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 294T細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCC-IT細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞
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