"Nthy-ori 3-1 Adherent人甲狀腺正常細胞系
細胞背景資料:甲狀腺;SV40轉(zhuǎn)化;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Nthy-ori 3-1 Adherent人甲狀腺正常細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結構變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。
SKNBE2C細胞系相關產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
293細胞系相關產(chǎn)品:NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
HCC78細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
B4G12細胞系相關產(chǎn)品:MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
MPASMC細胞系相關產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
SJ-RH30細胞系相關產(chǎn)品:SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
細胞生長特性:貼壁
Nthy-ori 3-1 Adherent人甲狀腺正常細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
VAESBJ細胞系相關產(chǎn)品:ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
IOSE80UBC細胞系相關產(chǎn)品:HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
MO59J細胞系相關產(chǎn)品:PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞
ARIP細胞系相關產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
HCT-8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
NCI-H1703細胞系相關產(chǎn)品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
K7M2-WT細胞系相關產(chǎn)品:SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
BL2141細胞系相關產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞
SUDHL-5細胞系相關產(chǎn)品:MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
HCC0202細胞系相關產(chǎn)品:B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
ASH-3細胞系相關產(chǎn)品:H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
DHL10細胞系相關產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
Nthy-ori 3-1 Adherent人甲狀腺正常細胞系
SK-HEP-1細胞系相關產(chǎn)品:SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
K422細胞系相關產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞
H1882細胞系相關產(chǎn)品:HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞
Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
HCCLM3細胞系相關產(chǎn)品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
HCC-1395細胞系相關產(chǎn)品:SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
L-cell細胞系相關產(chǎn)品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
HEC-151細胞系相關產(chǎn)品:HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞
BPH1細胞系相關產(chǎn)品:U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
SF-539細胞系相關產(chǎn)品:SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
L5178YR細胞系相關產(chǎn)品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
CCRF SB細胞系相關產(chǎn)品:H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
H1819細胞系相關產(chǎn)品:HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
QBI-293A細胞系相關產(chǎn)品:G401細胞、C33-A細胞、Hs729細胞
SW-1271細胞系相關產(chǎn)品:HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞
IB-RS-2細胞系相關產(chǎn)品:CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
COLO 201細胞系相關產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
H1417細胞系相關產(chǎn)品:Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
KYSE450細胞系相關產(chǎn)品:NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
H2108細胞系相關產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
H2030細胞系相關產(chǎn)品:Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
6T-CEM細胞系相關產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
Hs 729細胞系相關產(chǎn)品:SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
MDA-453細胞系相關產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
WERI細胞系相關產(chǎn)品:OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
BT549細胞系相關產(chǎn)品:HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
MCF12A細胞系相關產(chǎn)品:EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
HOS (TE85)細胞系相關產(chǎn)品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
NCI-H520細胞系相關產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
MFE-280細胞系相關產(chǎn)品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
McCoy細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關產(chǎn)品:HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
SKUT1細胞系相關產(chǎn)品:Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
KRC Y細胞系相關產(chǎn)品:L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
PE/CA-PJ34細胞系相關產(chǎn)品:HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
ATN-1細胞系相關產(chǎn)品:Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
Hs 578T細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
N1E-115細胞系相關產(chǎn)品:87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
WM115-mel細胞系相關產(chǎn)品:L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
SuDHL 10細胞系相關產(chǎn)品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
HCC-44細胞系相關產(chǎn)品:NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
Nthy-ori 3-1 Adherent人甲狀腺正常細胞系
FCCH1024細胞系相關產(chǎn)品:751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
B16-BL6細胞系相關產(chǎn)品:C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關產(chǎn)品:H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
Mc Coy細胞系相關產(chǎn)品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
IOSE80UBC細胞系相關產(chǎn)品:HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
1.1B4細胞系相關產(chǎn)品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
HEC1A細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
NSH細胞系相關產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
ChaGo-K-1細胞系相關產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細胞、DU4475細胞、NCI-N87細胞
HCC1599細胞系相關產(chǎn)品:ARO 81-1細胞、NCI/ADRRES細胞、SW 837細胞
MO59J細胞系相關產(chǎn)品:PIG3細胞、HPASMC細胞、CAKI.1細胞
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