"SCC-15 Adherent人鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SCC-15 Adherent人鱗狀細胞癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
細胞傳代方法：１：４-１：８傳代，２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
細胞生長特性：貼壁生長
SCC-15 Adherent人鱗狀細胞癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
H-2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
NCI-H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞
U266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
SU-DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
SCC-15 Adherent人鱗狀細胞癌細胞系
KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
HEK293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞
P3J.HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞
P3J.HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞
H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
BJ [Human fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
NCIH2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞
624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
hFOB1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Helacyton gartleri細胞、IPLB-SF 21細胞、Ramos細胞
2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
IPI-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞
HT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
Tj-905細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
D-283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞
U-343-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細胞、CMT 93細胞、H1568細胞
HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
RCC 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
SCC-15 Adherent人鱗狀細胞癌細胞系
NCIH2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
OVCA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞
MDA-PCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2110細胞、HT144mel細胞、MLMEC細胞
SUIT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細胞、Z-138細胞、MB-49細胞
NGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細胞、NCI-H1417細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929細胞、QBC939細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
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