"SCC-4 Adherent人類鱗狀上皮舌癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細(xì)胞死亡;時間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗(yàn)證;4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SCC-4 Adherent人類鱗狀上皮舌癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
T9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801D細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞、293F細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
SCC-4 Adherent人類鱗狀上皮舌癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長,但時間長之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細(xì)胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細(xì)胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補(bǔ),建議舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞
GLC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞、TE-8細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
DAKIKI Clone 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞
H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 125細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞
LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞
ZYM-DIEC02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞
NCI-H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 212細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞
RGM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC_7860細(xì)胞、MDA436細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞
SCC-4 Adherent人類鱗狀上皮舌癌細(xì)胞系
UACC893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-841細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
801-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC1細(xì)胞、Panc02細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞
LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞
786.O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2347細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞
SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞
NCIH2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Colon 38細(xì)胞、WB F344細(xì)胞、KE37細(xì)胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞
H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞
MDAMB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1080細(xì)胞、BC-023細(xì)胞、IM9細(xì)胞
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞
SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
TE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞
P3-X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H250細(xì)胞、JKT1細(xì)胞、SJSA細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞
HCC-1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10A細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞
Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞
NCI747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞
MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞
VE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細(xì)胞、LM3細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
SCC-4 Adherent人類鱗狀上皮舌癌細(xì)胞系
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
RBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞
H-187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞
RK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2405細(xì)胞、HNE3細(xì)胞、SNU601細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞
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