"Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過(guò)７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問(wèn)題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見(jiàn)得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
IB-RS2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1417細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞
G361-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細(xì)胞、TK-1細(xì)胞、REC 1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買(mǎi)，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過(guò)０~２０℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
Hela-mock細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
SCC 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
SHP-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG108-15細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞
TM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRCEC細(xì)胞、NS653細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞
Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細(xì)胞系
Hk-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細(xì)胞、BT20細(xì)胞、PC-10細(xì)胞
NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞
KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞
2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293A細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞、NCM460細(xì)胞
RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞
RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞
RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞
CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞
Granta-519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS13細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞
PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞
OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞
LTEP-s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC6細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞、TR 146細(xì)胞
CNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞
CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞
PaTu-8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞
H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-ATCC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞、RC-2細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞
HT144-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 436細(xì)胞、C6細(xì)胞、IHH細(xì)胞
HCMEC(BL12-H)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR10細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞
KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
CAL27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 231細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞、TO175T細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞
MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
LAN-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞
MKN 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、T2細(xì)胞
Detroit 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL6細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞
RKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451Lu細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
VMRC-RCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細(xì)胞、H-358細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞
D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞
RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞
GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
D-283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
MT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞
Kit225/K6 Lymphoblastoid cells人T淋巴細(xì)胞系
CALU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞、H1770細(xì)胞
BGC823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細(xì)胞、H-820細(xì)胞、YD38細(xì)胞
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