"K-562 Lymphoblastoid cells人慢性髓原白血病細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
Swiss 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
細胞生長:懸浮
K-562 Lymphoblastoid cells人慢性髓原白血病細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
F-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
K-562 Lymphoblastoid cells人慢性髓原白血病細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
H-2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
2E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞
LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
K-562 Lymphoblastoid cells人慢性髓原白血病細胞系
SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
JCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細胞、H-1975細胞、Fox/NY細胞
LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
SBC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
U2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞
JURKAT E-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
WM239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞
Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
EAhy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
Hs-746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞
HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
NCI-H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
CCD 841 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞
SUNE 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
GM-215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞
SNU-368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細胞、MS 751細胞、5-8F細胞
MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
AG06814-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
Fu97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
MGH-U1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
2B4-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
C1498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
C32 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞
RL-95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
K-562 Lymphoblastoid cells人慢性髓原白血病細胞系
ECC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細胞、ZR75-1細胞、NCI-H2228細胞
BT-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H719細胞、Ca761細胞、PANC.1細胞
UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細胞、IGROV-1細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
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