"CTLL-2 Lymphoblastoid cells小鼠T淋巴細胞系 細胞背景資料:該細胞是源自C57BL/6的細胞毒性的T淋巴細胞。其生長以來IL-2。 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 MDA-MB-231 #4175細胞系相關產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞 X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞 H719細胞系相關產(chǎn)品:CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞 細胞生長:懸浮 CTLL-2 Lymphoblastoid cells小鼠T淋巴細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結構變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正常現(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:2傳代 MOPC細胞系相關產(chǎn)品:HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞 PATU-S細胞系相關產(chǎn)品:SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞 H-69細胞系相關產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞 HASMC細胞系相關產(chǎn)品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞 NE1細胞系相關產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 CTLL-2 Lymphoblastoid cells小鼠T淋巴細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! MV-1-Lu細胞系相關產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞 OAW-42細胞系相關產(chǎn)品:SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞 MG-63細胞系相關產(chǎn)品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞 Jurkat (clone E6-1)細胞系相關產(chǎn)品:SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞 Pt K1細胞系相關產(chǎn)品:Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞 IPAM-WT細胞系相關產(chǎn)品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞 E.G7-OVA細胞系相關產(chǎn)品:EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞 UWB1.289細胞系相關產(chǎn)品:118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞 E.L.4細胞系相關產(chǎn)品:HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞 NCI-H292細胞系相關產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞 CTLL-2 Lymphoblastoid cells小鼠T淋巴細胞系 LLC-MK2細胞系相關產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞 P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞 SNGM細胞系相關產(chǎn)品:H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞 BEP2D細胞系相關產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞 DMS-79細胞系相關產(chǎn)品:U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞 DMS-79細胞系相關產(chǎn)品:U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞 CL1.0細胞系相關產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞 Hs675T細胞系相關產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞 NCI-H1694細胞系相關產(chǎn)品:H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞 H2126細胞系相關產(chǎn)品:AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞 UACC812細胞系相關產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞 HC11細胞系相關產(chǎn)品:MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞 A-172 MG細胞系相關產(chǎn)品:HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞 RT112細胞系相關產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 PANC0813細胞系相關產(chǎn)品:293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞 NCI-H250細胞系相關產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞 IMR-32細胞系相關產(chǎn)品:BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞 Hs 695.T細胞系相關產(chǎn)品:HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞 J45.01細胞系相關產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞 H-292細胞系相關產(chǎn)品:WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞 3T3 L1細胞系相關產(chǎn)品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞 AN3 CA細胞系相關產(chǎn)品:BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞 KBM-7細胞系相關產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞 B-95-8細胞系相關產(chǎn)品:L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞 Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞 BC-019細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞 WML2細胞系相關產(chǎn)品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞 K1735細胞系相關產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞 HEC1A細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞 HCC-2279細胞系相關產(chǎn)品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞 SNU-761細胞系相關產(chǎn)品:HM1900細胞、MES 13細胞、769P細胞 HSC-I細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞 Colo-201細胞系相關產(chǎn)品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞 NCI-H1975細胞系相關產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞 MCF-10 Attached細胞系相關產(chǎn)品:NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞 SMA 560細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞 HuT 102細胞系相關產(chǎn)品:CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞 HEK293-F細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞 NCI-H1568細胞系相關產(chǎn)品:MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞 HCC9204細胞系相關產(chǎn)品:BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞 RCSMC細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞 LC-2 ad細胞系相關產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞 SKO007細胞系相關產(chǎn)品:L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞 PLA-802細胞系相關產(chǎn)品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞 PIG1細胞系相關產(chǎn)品:L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞 M-20細胞系相關產(chǎn)品:HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞 NGP細胞系相關產(chǎn)品:CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞 EVSAT細胞系相關產(chǎn)品:MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞 UWB1289細胞系相關產(chǎn)品:A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞 Psi-2 DAP細胞系相關產(chǎn)品:HFT 8810細胞、SJRH 30細胞、HCC1954 BL細胞 CTLL-2 Lymphoblastoid cells小鼠T淋巴細胞系 CLL-CII細胞系相關產(chǎn)品:SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞 COLO 394細胞系相關產(chǎn)品:HRPEpiC細胞、TH1細胞、HLEB-3細胞 HOC細胞系相關產(chǎn)品:H-2073細胞、TE-15細胞、NIT-1細胞 MG-63細胞系相關產(chǎn)品:TEV-1細胞、RBL-I細胞、H1792細胞 "
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