"YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:YAC-1源自Mo-MuLV誘導的A/Sn小鼠淋巴瘤。細胞對NK細胞的作用敏感,可用于NK細胞活性檢測。鼠痘病毒陰性。 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 RT-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞 Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞 CMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞 細胞生長:懸浮 YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2傳代 N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞 hTERT-HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞 CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞 Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞 NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞 KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞 MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞 NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞 H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞 Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞 MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞 DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞 NCI-H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞 SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞 YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細胞系 K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞 HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞 CCD-112CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞 MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞 Hs729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 08.13細胞、HONE1細胞、MC3T3-E細胞 A704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞 SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞 M619細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H498細胞、PC-10細胞、UM-RC-2細胞 BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞 IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞 KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞 P3.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞 RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞 NCI-H1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-520細胞、MESSA細胞、H-748細胞 HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞 H-378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞 OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞 COLO 206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細胞、CCD 966 SK細胞、Hi-five細胞 HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞 HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞 32Dc3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細胞、BMSCs(mBMSCs)細胞、BE(2)M-17細胞 HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞 HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞 MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞 PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞 Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞 Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞 H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞 Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞 A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞 BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞 M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞 SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞 Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞 Functional Liver Cell-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞 SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞 MDCK.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞 ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞 YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞 RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 COLO 394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞 HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞 NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞 KBM-7/Hap8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞 C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞 H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞 NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞 NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞 SUM102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞 L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞 Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞 YAC-1 Lymphoblastoid cells小鼠淋巴瘤細胞系 KU812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞 174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H446細胞、NCIH1930細胞、HCT15細胞 Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04671細胞、H341細胞、EC-GI-10細胞 MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細胞、RMC-1細胞、L-929細胞 "
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