"LA-N-1 epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤；骨髓轉(zhuǎn)移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
DU_145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞
V 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞
細胞生長：貼壁
LA-N-1 epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
MMAc.SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LA-N-1 epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
DHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞
NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
UCLA-RO 81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞
CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
Hep G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞
HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
LA-N-1 epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞
ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
Nthy-ori 3-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
CCC-HIE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
MDA-MB-134 VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞
MDA-MB-134 VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞
3T3-Swiss細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
OCI-AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
HuT-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
KNS-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme3M細胞、NK10a細胞、TB-1 Lu細胞
HCC-1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
SK-Col-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1838細胞、NIE-115細胞、TYK-nu細胞
H1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞
MSTO-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-748細胞、Bx-PC3細胞、ECGI10細胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細胞、Swiss-3T3細胞、H-2087細胞
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
RMS1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
SW-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞
SW1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
SMMC 7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
MFM-223細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞
HT 1197.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
Caki2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
MDA-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞
KATO 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞
Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞
Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞
U-2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
LA-N-1 epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、HLF-a細胞、WSU-DLCL(2)細胞
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細胞、NPA'87細胞、TCam 2細胞
DHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 BL6細胞、TGBC11TKB細胞、T.T細胞
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