"LA-N-5 epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：神經(jīng)母細(xì)胞瘤；骨髓轉(zhuǎn)移；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
RN-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-1細(xì)胞、X63細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
LA-N-5 epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC251細(xì)胞、TE15細(xì)胞、BJ1細(xì)胞
MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞
OV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細(xì)胞、RK-13細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞
mREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞
HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細(xì)胞、AC29細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
LA-N-5 epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
BE2M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞
MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、BC-027細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
Rat podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239-A細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細(xì)胞、U266BL細(xì)胞、C 6細(xì)胞
tdott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0813細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞、U-2932細(xì)胞
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞
LA-N-5 epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞
M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
BJA-B-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞
Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞
H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
Leukemia L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞、HCGC細(xì)胞
BpRc1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME1細(xì)胞、H1048細(xì)胞、IM-9細(xì)胞
KU 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9 (Hamprecht)細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞
Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞
MCA 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞
ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞
WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞
Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
HuH 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞
BT483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN-12C細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
L615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞
LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞
EJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa-RG細(xì)胞、SNT8細(xì)胞、CORL105細(xì)胞
PLB-985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞
GS9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞、RGE細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2227細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞
MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞
MZ-CRC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞
MZ-CRC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞
HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞
S91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞
SU86_86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞
LAN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82sclc細(xì)胞、207細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
SK-ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細(xì)胞、Sp2/0-Ag14細(xì)胞、J 111細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
AU 565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞
LA-N-5 epithelioid cells人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞
HTori-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞
Hs 578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1171細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞
"