"SW527細(xì)胞:人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
目前,跟公司簽訂長期戰(zhàn)略合作伙伴的科研單位有山西中醫(yī)學(xué)院、福建醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院、上海市第六人民醫(yī)院、北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部、同濟(jì)大學(xué)、四平中心醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學(xué)、中科院上海生命科學(xué)研究院生化與細(xì)胞研究所、解放軍第306醫(yī)院、江南大學(xué)、西南醫(yī)院、吉首大學(xué)、西南大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院、寧波大學(xué)、福建醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、蘇州市同濟(jì)醫(yī)院、中南大學(xué)、延安大學(xué)附屬醫(yī)院、中國科學(xué)院上海藥物研究所、天津市兒童醫(yī)院、江蘇省中醫(yī)藥研究院、湘雅醫(yī)學(xué)院、第四軍醫(yī)大學(xué)預(yù)防系勞動與環(huán)境教研室、揚(yáng)州大學(xué)、上海交通大學(xué)、中國醫(yī)科大學(xué)、浙江省立同德醫(yī)院、中國人民解放軍第150中心醫(yī)院、蘇州大學(xué)、四川大學(xué)華西醫(yī)院、云南大學(xué)、揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院、海南醫(yī)學(xué)院、江蘇腫瘤醫(yī)院、上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院、大連醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院、沈陽藥科大學(xué)、廣州市第八人民醫(yī)院、南京大學(xué)、浙江中醫(yī)藥大學(xué)、蘭州大學(xué)、上海中醫(yī)藥大學(xué)、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所、廈門市婦幼保健院、大學(xué)、南京軍區(qū)總醫(yī)院、天津市人民醫(yī)院、北京醫(yī)學(xué)科學(xué)腫瘤醫(yī)院、上海市同濟(jì)醫(yī)院、江蘇大學(xué)、桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院、中國科學(xué)院化學(xué)研究所
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序:采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時,1~2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,5~10℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-100℃時,可迅速放入液氮中。2.簡易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。細(xì)胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細(xì)胞生長液(92%血清)2.取對數(shù)生長期細(xì)胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量凍存液,用吸管吹打制成細(xì)胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml)。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中,密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
COLO_320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞、H22細(xì)胞
Nakata-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞
CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
M-07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞、NCI-H2108細(xì)胞
FHC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELA-GFP細(xì)胞、T-24細(xì)胞、S91細(xì)胞
L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT1細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
WEHI3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞
OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞
A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-33細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞
COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞:-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞
H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞
SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞
BMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞
LTEP-a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞:-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞
BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149PT細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞
NCIH292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 683T細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞、BRL細(xì)胞
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
KOPN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1954細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞
MA104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
LNCaP C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480E細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞、NK92細(xì)胞
MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞
Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
Y3.AG.1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞
Me Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB453細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞
1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
IHH-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞
P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
HcerEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-596細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞、751-NA細(xì)胞
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞
LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICCF細(xì)胞、5637細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞
MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
TK10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY70細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞
ZR-75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-27細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞、L2細(xì)胞
HNEpC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-77細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1963細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-02細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、LS-180細(xì)胞
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