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今天分享腎上腺皮質(zhì)激素類藥物-達(dá)格列凈特定雜質(zhì)溶液穩(wěn)定性研究分享，達(dá)格列凈是一是一種競爭性葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2 (SGLT2) 抑制劑，可導(dǎo)致尿液中葡萄糖的排泄，用于糖尿病 (DM) 的研究。

在本次實(shí)驗(yàn)中，我中心參照國家藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的《達(dá)格列凈》進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)中“有關(guān)物質(zhì)”項(xiàng)下所使用的色譜條件對達(dá)格列凈地四個特定雜質(zhì)進(jìn)行了溶液穩(wěn)定性研究，所用樣品貨號及結(jié)構(gòu)式如下如圖1和圖2：

圖1：本次研究所用雜質(zhì)貨號及結(jié)構(gòu)式

圖2：原料藥及標(biāo)準(zhǔn)收錄的雜質(zhì)代碼和本次研究所用雜質(zhì)貨號對應(yīng)關(guān)系圖

在本次實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)員將RM-D021016(達(dá)格列凈α異構(gòu)體)、RM-D160722（恩格列凈過氧化物）、RM-D160712（去乙基達(dá)格列凈）和RM-D160713（代碼BMS-801575）各取適量，分別放置在pH=A、B、C的溶液中，分別于0、1、2、4、8、12、24左右進(jìn)樣檢測，發(fā)現(xiàn)RM-D021016、RM-D160712和RM-D160713三個樣品在pH=A、B、C的溶液中放置24小時的過程中主峰峰面積變化不大，可以認(rèn)為RM-D021016、RM-D160712和RM-D160713三個樣品在pH=A、B、C的溶液中放置24小時的過程中是比較穩(wěn)定的，這三個樣品在各pH值條件下每個檢測點(diǎn)主峰峰面積數(shù)據(jù)如下：

圖3：樣品RM-D160712的溶液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)匯總折線圖

圖4：樣品RM-D160713的溶液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)匯總折線圖

圖5: 樣品RM-D021016的溶液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)匯總折線圖

在本次研究中，我們發(fā)現(xiàn)重點(diǎn)觀測的雜質(zhì)達(dá)格列凈過氧化物RM-D160722在《達(dá)格列凈》進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)中“有關(guān)物質(zhì)”項(xiàng)下所使用的色譜條件下出了雙峰，于是本次研究通過開發(fā)方法在LCMS上檢測了這兩個色譜峰的分子量，發(fā)現(xiàn)兩個色譜峰對應(yīng)的MS峰的分子量相同，所以達(dá)格列凈過氧化物RM-D160722在《達(dá)格列凈》進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)中“有關(guān)物質(zhì)”項(xiàng)下所使用的色譜條件下出雙峰的原因應(yīng)該是由樣品分子中的手性碳原子的異構(gòu)所引起的：

圖6:達(dá)格列凈過氧化物雜質(zhì)的手性碳原子示意圖

圖7：達(dá)格列凈過氧化物雜質(zhì)的LCMS圖譜

圖8：達(dá)格列凈過氧化物雜質(zhì)的MS分子量示意圖（正離子）

圖9：達(dá)格列凈過氧化物雜質(zhì)的MS分子量示意圖（負(fù)離子）

從圖8和圖9可以看出，在正離子模式下，兩個色譜峰都出了[M-OH]的分子量，在負(fù)離子模式下，兩個色譜峰都出了[M+HCOOH]的分子量，所以從lc-ms數(shù)據(jù)可以驗(yàn)證前面的想法。

在后續(xù)穩(wěn)定性檢測的過程中，我們發(fā)現(xiàn)在達(dá)格列凈過氧化物RM-D160722在pH=A、B、C的溶液中放置24小時的過程中，兩個色譜峰的面積均有不同程度的降解，所以在將溶液放置N天后再次進(jìn)樣，發(fā)現(xiàn)樣品均出現(xiàn)較多降解，其中以pH=A與pH=C條件下的樣品降解明顯，數(shù)據(jù)匯總折線圖如下所示：

圖10：達(dá)格列凈過氧化物在pH=A、B、C的溶液中的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)圖

圖11：達(dá)格列凈過氧化物在不同pH溶液中放置不同時間后的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)3D圖

從以上數(shù)據(jù)可以看到，達(dá)格列凈過氧化物RM-D160722在pH=A、B、C的溶液中放置N天的過程中，會發(fā)生不同程度的降解，尤其是在pH=A和pH=C的溶液中降解明顯，所以客戶在使用該樣品時應(yīng)注意避免用相關(guān)酸堿性溶液配制樣品，盡量現(xiàn)配現(xiàn)測，在儲存時應(yīng)注意以防發(fā)生降解。

除此之外，本中心還對達(dá)格列凈過氧化物進(jìn)行了不同溫度下的溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，如果客戶對該樣品的穩(wěn)定性內(nèi)容有需要，可以向本公司咨詢。