Tris、Tris HCl、Bis-Tris的制備方法及使用注意事項(xiàng)
Tris(三羥甲基氨基甲烷)可用于包括TAE和TBE在內(nèi)的各種緩沖溶液中。Tris也可以用于運(yùn)行和加載緩沖劑,例如用于SDS-PAGE。其有效pH范圍是7.0至9.0。Tris緩沖液的兩種常見形式是Tris堿和Tris HCl。使用Tris HCl替代NaOH或HCl的其他優(yōu)點(diǎn)包括安全性和可重復(fù)性。

如何制作Tris和Tris HCl及使用注意事項(xiàng)
Tris Base和Tris HCl的制備步驟:
Tris:要制備1升1M Tris緩沖液,請(qǐng)將121.14 g Tris溶解在750 mL dH2O中。用濃鹽酸調(diào)節(jié)至所需的pH。pH值可以通過(guò)增加Tris HCl(酸性增加)或Tris堿(堿性增加)的摩爾比來(lái)調(diào)節(jié)并使用Hendersen-Hasselbalch方程進(jìn)行估算。用dH2O填充至終體積1L,并通過(guò)過(guò)濾器或高壓釜滅菌。儲(chǔ)存在4?C。
Tris HCl:要制備1升1M Tris HCl緩沖液,請(qǐng)將157.60 g Tris HCl溶解在750 mL dH2O中。使用10N氫氧化鈉調(diào)節(jié)至所需的pH。您可以在1M Tris HCl Buffer方案中使用一張表。用dH2O填充至終體積1L,并通過(guò)過(guò)濾器或高壓釜滅菌。儲(chǔ)存在4?C。
使用注意事項(xiàng):
使用Tris溶液的一個(gè)技巧是溶液的pH值非常依賴于溫度。因此,應(yīng)在使用緩沖液的溫度下制備Tris。此外,應(yīng)避免使用含Tris緩沖液的含銀的單結(jié)pH電極。

如何制作Bis-Tris及使用注意事項(xiàng)
Bis-Tris是Bis(2-羥乙基)胺緩沖液家族的成員。在壓力變化的實(shí)驗(yàn)中,凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中以及在陰離子交換色譜法和NMR期間,您可以使用這種緩沖液來(lái)抵抗pH的變化。該緩沖液的pH范圍是5.8至7.2。
Bis-Tris制備步驟:
要制備1升1M Bis-Tris緩沖原液,請(qǐng)將209.24 g Bis-Tris溶解 在750 mL dH2O中。使用濃鹽酸調(diào)節(jié)至所需的pH值。您可以在Bis-Tris PDF協(xié)議中使用表格。用dH2O填充至終體積1L,并通過(guò)過(guò)濾器或高壓釜滅菌。將緩沖液存儲(chǔ)在4攝氏度下。
注意事項(xiàng):
當(dāng)使用Bis-Tris緩沖溶液時(shí),請(qǐng)記住Bis-Tris與鉛,銅和其他各種金屬形成絡(luò)合物。除上述用途外,Bis-Tris可以替代作為有毒緩沖劑碳酸氫鈣的安全替代品。