?

今天希望通過(guò)對(duì)恩格列凈過(guò)氧化雜質(zhì)研究，能為客戶(hù)對(duì)SGLT-2抑制劑-列凈類(lèi)化合物過(guò)氧化雜質(zhì)研究提供幫助。SGLT-2抑制劑中最耀眼的兩顆明星就是恩格列凈和達(dá)格列凈。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，勃林格殷格翰的恩格列凈22年的銷(xiāo)售額就突破了82億美金，阿斯利康的達(dá)格列凈也在2022年賣(mài)出了近44億美金。SGLT-2抑制劑系列化合物信息，如圖1：

圖1：SGLT-2抑制劑系列化合物信息

恩格列凈目前有單方和復(fù)方（恩格列凈二甲雙胍），所以研發(fā)仿制的企業(yè)很多。根據(jù)振強(qiáng)內(nèi)部數(shù)據(jù)，僅2023年向我司采購(gòu)過(guò)恩格列凈雜質(zhì)的企業(yè)就超過(guò)了45家。目前QCS官網(wǎng)上總共收錄了恩格列凈雜質(zhì)94個(gè)（掃描文末二維碼，查看所有雜質(zhì)列表）。本文將介紹我中心參照《恩格列凈片》進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)號(hào)JX20150247）對(duì)恩格列凈過(guò)氧化物進(jìn)行的相關(guān)檢測(cè)研究工作（恩格列凈過(guò)氧化物結(jié)構(gòu)信息如圖2：）。

圖2：恩格列凈過(guò)氧化物結(jié)構(gòu)信息

根據(jù)《恩格列凈片》進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)號(hào)JX20150247）中有關(guān)物質(zhì)方法，我中心首先對(duì)該過(guò)氧化物雜質(zhì)進(jìn)行了液相定性定位研究，色譜條件參照標(biāo)準(zhǔn)中的有關(guān)物質(zhì)方法（見(jiàn)圖3）

圖3：片劑進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)物質(zhì)方法

參照此方法，我中心對(duì)實(shí)驗(yàn)室合成的恩格列凈過(guò)氧化物進(jìn)行了測(cè)試，該過(guò)氧化物雜質(zhì)與恩格列凈原料藥的混合進(jìn)樣結(jié)果見(jiàn)圖5，過(guò)氧化物雜質(zhì)單獨(dú)進(jìn)樣圖譜結(jié)果見(jiàn)圖4：

圖4：恩格列凈過(guò)氧化物檢測(cè)色譜圖

恩格列凈過(guò)氧化物與恩格列凈混合進(jìn)樣數(shù)據(jù)如圖5：

圖5：恩格列凈及其過(guò)氧化物混樣圖譜

以上色譜結(jié)果中，恩格列凈保留時(shí)間7.7分鐘，過(guò)氧化物雜質(zhì)保留時(shí)間3.6-3.8分鐘呈雙峰。由于過(guò)氧化物雜質(zhì)是一對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體混合物（結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖6，關(guān)鍵手性以紅色標(biāo)注），進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)條件對(duì)該結(jié)構(gòu)有一定的分離效果因而產(chǎn)生雙峰。

圖6：產(chǎn)生雙峰的手性碳位置圖

QCS研發(fā)中心使用液質(zhì)聯(lián)用色譜（LCMS）對(duì)該樣品進(jìn)行了確認(rèn)。通過(guò)方法優(yōu)化，恩格列凈過(guò)氧化物雜質(zhì)樣品的雙峰結(jié)果可以在LCMS中得到復(fù)現(xiàn)（圖7），通過(guò)對(duì)兩個(gè)色譜峰的MS進(jìn)行對(duì)比（圖8&圖9）驗(yàn)證了該結(jié)論。

圖7：過(guò)氧化物雙峰的LC-MS圖譜

圖8:過(guò)氧化物L(fēng)C-MS圖譜中RT=38.272min色譜峰（左）和RT=40.275min色譜峰（右）的MS結(jié)果（模式：正離子)

圖9：過(guò)氧化物L(fēng)C-MS圖譜中RT=38.272min色譜峰（左）和RT=40.275min色譜峰（右）的MS結(jié)果（模式：負(fù)離子)

從LC-MS檢測(cè)數(shù)據(jù)可以看到，恩格列凈過(guò)氧化物所出的兩個(gè)色譜峰在正離子模式下都出了[M+K]+的分子量，在負(fù)離子模式下都出了[M+HCOO]-的分子量，而且在正離子和負(fù)離子的模式下，兩個(gè)色譜峰所處的分子量都是一樣的。

此外，我研究中心對(duì)該樣品進(jìn)行了核磁共振波譜測(cè)試和二級(jí)質(zhì)譜檢測(cè)，該樣品核磁波譜結(jié)果可以觀測(cè)到產(chǎn)品結(jié)構(gòu)信號(hào)；二級(jí)質(zhì)譜結(jié)果中可見(jiàn)明確的次級(jí)離子碎裂結(jié)構(gòu)，以上信息均符合產(chǎn)品結(jié)構(gòu)。從核磁氫譜數(shù)據(jù)也能看到該產(chǎn)品存在兩套峰，從側(cè)面證明了該產(chǎn)品是一對(duì)非對(duì)應(yīng)異構(gòu)體化合物存在，如圖10：

圖10：恩格列凈過(guò)氧化物HNMR圖譜和二級(jí)質(zhì)譜結(jié)果

除了以上工作外，我中心還根據(jù)《恩格列凈片》進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)號(hào)JX20150247）中有關(guān)物質(zhì)方法對(duì)恩格列凈過(guò)氧化物（RM-E131628）進(jìn)行了溶液穩(wěn)定性檢測(cè)，分別在配樣后0、1、2、4、8、12、24小時(shí)下進(jìn)樣檢測(cè)，樣品放置在室溫下，未避光，檢測(cè)數(shù)據(jù)總結(jié)如下：

圖11：恩格列凈API（RM-E131600）及恩格列凈過(guò)氧化物（RM-E131628）溶液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)匯總

從圖11中可以看出，在室溫（未避光）的條件下恩格列凈過(guò)氧化物（RM-E131628）溶液相對(duì)穩(wěn)定?？梢钥吹皆谂錁雍蟛煌瑫r(shí)間點(diǎn)對(duì)恩格列凈過(guò)氧化物和內(nèi)標(biāo)物（恩格列凈API）的混合樣品進(jìn)行監(jiān)控，結(jié)果顯示該雜質(zhì)穩(wěn)定性良好，不同時(shí)間點(diǎn)內(nèi)恩格列凈過(guò)氧化物峰1、峰2保留時(shí)間和峰面積無(wú)顯著變化（RSD值均小于2.0%）。說(shuō)明在室溫、未避光，樣品溶液pH值為中性的條件下，恩格列凈過(guò)氧化物的樣品溶液是穩(wěn)定的。

另外，我中心除了對(duì)恩格列凈過(guò)氧化物（RM-E131628）做了HNMR、CNMR、DEPT、COSY、HSQC、HMBC和NOESY的全套核磁共振測(cè)試并提供相關(guān)圖譜解析。若客戶(hù)有意購(gòu)買(mǎi)本公司恩格列凈過(guò)氧化物（RM-E131628）產(chǎn)品，本公司將會(huì)與客戶(hù)分享CNMR、DEPT、COSY、HSQC、HMBC和NOESY圖譜及圖譜解析的內(nèi)容。如果您有采購(gòu)意向，請(qǐng)聯(lián)系小編吧。

除恩格列凈過(guò)氧化物雜質(zhì)產(chǎn)品外，我中心已經(jīng)完成了對(duì)恩格列凈過(guò)氧化物和達(dá)格列凈過(guò)氧化物的研究。以上產(chǎn)品均使用相關(guān)注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行了驗(yàn)證，如有需要也請(qǐng)聯(lián)系小編吧。

我中心目前已經(jīng)完成了對(duì)以下四個(gè)SGLT-2抑制劑-列凈類(lèi)化合物過(guò)氧化物的合成工作，卡格列凈和艾托格列凈過(guò)氧化物目前處于檢測(cè)信息收集階段，歡迎咨詢(xún)。

圖12：SGLT-2抑制劑過(guò)氧化物結(jié)構(gòu)式信息

恩格列凈過(guò)氧化物雜質(zhì)是我中心已經(jīng)非常成熟的產(chǎn)品，但是之前接到某客戶(hù)反饋在msms條件下與別的供應(yīng)商的數(shù)據(jù)有沖突，所以我中心也同步的檢測(cè)了msms數(shù)據(jù)，并結(jié)合我們的核磁二維數(shù)據(jù)做了同步分析，大家可以放心使用。對(duì)此有疑問(wèn)或者需求的客戶(hù)可以聯(lián)系我們。