乳果糖是自然界中不存在的一種人工合成不吸收性雙糖，在小腸內(nèi)不被吸收。它是一種臨床常用的導(dǎo)瀉藥，可以用于慢性或習(xí)慣性便秘，調(diào)節(jié)結(jié)腸的生理節(jié)律；同樣也可以用于治療肝性腦病，降低血氨。

今天分享一個(gè)熱門研發(fā)品種乳果糖口服液相關(guān)雜質(zhì)研究，乳果糖口服液主要用于便秘治療，目前據(jù)說國內(nèi)暫無競品。據(jù)米內(nèi)網(wǎng)介紹，在2021年，治療便秘的化藥產(chǎn)品排名中，乳果糖口服溶液穩(wěn)居首位。米內(nèi)網(wǎng)數(shù)據(jù)顯示，近年來該產(chǎn)品在中國三大終端6大市場的銷售額逐年上漲，2021年更是突破18億元，同比增長23.08%。

乳果糖口服溶液（LactuloseOral Solution），本品為棕黃色澄明粘稠液體。用于治療高血氨癥及由血氨升高引起的疾??；用于治療慢性功能性便秘。

目前QCS官網(wǎng)上總共收錄了乳果糖雜質(zhì)22個(gè)（掃描文末二維碼，查看所有雜質(zhì)列表），其中乳果糖EP雜質(zhì)F由于其結(jié)構(gòu)的特殊性在定向合成存在一定挑戰(zhàn)性。我中心采用定向合成手段，共計(jì)八部化學(xué)反應(yīng)可以高效的制備乳果糖EP雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品（QCS貨號：RM-L010316，結(jié)構(gòu)信息如圖1）。

對于本產(chǎn)品我中心參照《乳果糖濃溶液》原料進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)號JX20170210）和歐洲藥典等文獻(xiàn)資料進(jìn)行了研究。使用歐洲藥典峰鑒別標(biāo)準(zhǔn)品與QCS生產(chǎn)的乳果糖雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行了定性定位對比研究，有效確證了QCS乳果糖雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品的適用性。本文將對乳果糖EP雜質(zhì)F的物理化學(xué)性質(zhì)、色譜結(jié)果特征等資料做一個(gè)分享。

圖1：乳果糖EP雜質(zhì)F結(jié)構(gòu)信息

乳果糖相關(guān)物質(zhì)研究可參考《乳果糖濃溶液》原料進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)號JX20170210）資料，該進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)物質(zhì)方法使用了氨丙基鍵合硅膠作為固定相使用視差折光檢測器進(jìn)行測定，其具體條件及標(biāo)準(zhǔn)中各雜質(zhì)的限度見圖2和圖3。

圖2：利原料進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)物質(zhì)方法

圖3：原料進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)中各雜質(zhì)的限度

由于氨丙基鍵合硅膠固定相對糖類物質(zhì)具有較好的分離效果，而且視差折光檢測器對該類物質(zhì)較好的靈敏度（峰鑒別CRS典型色譜圖見圖4）。為了驗(yàn)證我中心生產(chǎn)的乳果糖雜質(zhì)F跟EP標(biāo)準(zhǔn)收錄的一致性，QCS研發(fā)中心使用歐洲藥典(EP)標(biāo)準(zhǔn)品乳果糖峰鑒別對照品（Lactulose for peak identification CRScat：Y0001510 ）與QCS生產(chǎn)的乳果糖雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行了系列的定性定位對比研究。

圖4：峰鑒別CRS典型色譜圖

我中心使用相近色譜填料作為固定相并采用視差折光檢測器作為檢測手段，搭建了乳果糖雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品色譜檢測環(huán)境。在進(jìn)行乳果糖雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品檢測之前，我中心首先使用了歐洲藥典(EP)標(biāo)準(zhǔn)品乳果糖峰鑒別對照品（Lactulose for peak identification CRScat：Y0001510 ），對我中心色譜條件進(jìn)行了驗(yàn)證，以圖重現(xiàn)CRS的標(biāo)準(zhǔn)色譜結(jié)果，具體的重現(xiàn)數(shù)據(jù)如圖5：

圖5:峰鑒別對照品QCS重現(xiàn)圖

從圖5可以看出，我中心色譜方法下乳果糖峰鑒別對照品中的各個(gè)組分可以實(shí)現(xiàn)有效分離，各組分相對比例和出峰順序與CRS典型色譜圖一致，基本能重現(xiàn)歐洲藥典(EP)標(biāo)準(zhǔn)品乳果糖峰鑒別對照品的典型色譜圖。隨后在該方法下我中心進(jìn)樣了乳果糖EP雜質(zhì)F，以對我司產(chǎn)品進(jìn)行驗(yàn)證（我司產(chǎn)品色譜結(jié)果見圖6）。

圖6：QCS生產(chǎn)的乳果糖EP雜質(zhì)F進(jìn)樣色譜圖

從圖譜可以看出，雜質(zhì)F的保留時(shí)間跟CRS中雜質(zhì)F的保留時(shí)間是一致，為了再次驗(yàn)證雜質(zhì)F的準(zhǔn)確性，我們將雜質(zhì)F加樣到歐洲藥典(EP)標(biāo)準(zhǔn)品乳果糖峰鑒別對照品樣品溶液中，得到的混合進(jìn)樣數(shù)據(jù)如圖7：

圖7:QCS乳果糖EP雜質(zhì)F與EP的峰鑒別混樣色譜圖

圖8:QCS乳果糖EP雜質(zhì)F與EP的峰鑒別色譜結(jié)果對比

圖9：QCS生產(chǎn)的乳果糖EP雜質(zhì)F核磁共振氫譜圖

從前后對比數(shù)據(jù)可以看出，QCS生產(chǎn)的乳果糖EP雜質(zhì)F呈單峰，其保留時(shí)間與峰鑒別樣品中雜質(zhì)F的保留時(shí)間一致。同時(shí)，QCS乳果糖EP雜質(zhì)F與EP峰鑒別標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行的混合進(jìn)樣結(jié)果中，QCS乳果糖EP雜質(zhì)F的加入未產(chǎn)生新的雜質(zhì)峰，只有雜質(zhì)F的峰面積明顯發(fā)生了變化（aera由2000為9000）且其他雜質(zhì)峰峰面積無明顯變化。

以上結(jié)果表明QCS生產(chǎn)的乳果糖EP雜質(zhì)F其適用性良好，且具有較高的色譜純度（純度接近100%），該產(chǎn)品在進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)或歐洲藥典條件下出單峰。出雙峰只是理論上的可能，在該色譜體系下是不成立的，只要純度符合要求該產(chǎn)品在此色譜條件中應(yīng)為單峰。

為了更好的對乳果糖EP雜質(zhì)F進(jìn)行表征，我研發(fā)中心對該產(chǎn)品進(jìn)行了核磁共振氫譜的測試（結(jié)果見圖9）。同時(shí)基于核磁共振可以提供的無損檢測，QCS研發(fā)中心在重水條件下對乳果糖EP雜質(zhì)F進(jìn)行了為期數(shù)天的穩(wěn)定性測試實(shí)驗(yàn)（穩(wěn)定性檢測結(jié)果見圖10）。

圖10：基于核磁共振方法對乳果糖EP雜質(zhì)F的穩(wěn)定性監(jiān)測結(jié)果

通過對不同溫度和時(shí)間條件下的產(chǎn)品穩(wěn)定性測試，可以看到乳果糖EP雜質(zhì)F對溫度具有一定的敏感性在長時(shí)間的室溫或短時(shí)間高溫條件下產(chǎn)品會發(fā)生明顯的降解。因此QCS研發(fā)中心提醒您在使用乳果糖EP雜質(zhì)F過程中請做好溫度控制，防止產(chǎn)品因?yàn)樯郎貙?dǎo)致降解而影響您的使用。

我中心采用定向合成手段，共計(jì)八部化學(xué)反應(yīng)可以高效的制備乳果糖EP雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品（QCS貨號：RM-L010316，結(jié)構(gòu)信息如圖1）。該品呈無色油狀液體，極易溶于水或乙腈。由于糖類結(jié)構(gòu)存在檢測的挑戰(zhàn)性，我中心參照《乳果糖濃溶液》原料進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)號JX20170210），使用歐洲藥典峰鑒別與QCS生產(chǎn)的乳果糖雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行了定性定位對比研究，液相色譜結(jié)果合格。基于核磁共振方法對乳果糖EP雜質(zhì)F的穩(wěn)定性監(jiān)測結(jié)果建議該產(chǎn)品注意低溫保存。

QCS研發(fā)中心制備分離部的丘H娜研究員在該項(xiàng)目的純化分離中做出了極大貢獻(xiàn)。從樣品分析檢測方法的測試到制備色譜純化工藝的開發(fā)，丘H娜研究員篩選了十多種填料固定相和色譜方法，整理撰寫了數(shù)十頁的《QCS研發(fā)中心-乳果糖相關(guān)物質(zhì)F純化制備報(bào)告》，對產(chǎn)品穩(wěn)定性、產(chǎn)品純度測試、保存/運(yùn)輸方法做出了系統(tǒng)研究。希望該研究數(shù)據(jù)能給使用乳果糖相關(guān)物質(zhì)F的客戶帶來幫助。