應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP)水平。用純化的人腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP)，再與HRP標記的腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人腸肪酸結(jié)合蛋白（iFABP)濃度。