NCI-H716 [H716]是從一位33歲白人男性結(jié)直腸癌患者的盲腸中分離出來(lái)的一株淋巴母細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞系。該細(xì)胞系可用于癌癥研究。從一位經(jīng)5-氟尿嘧啶治療的患者腹水中得到的細(xì)胞建立了這個(gè)細(xì)胞株。 與其它結(jié)直腸癌細(xì)胞系不同，這株細(xì)胞有多巴脫羧酶，細(xì)胞質(zhì)中有核心致密的內(nèi)分泌型顆粒。 這株細(xì)胞不表達(dá)TAG-72 或CA19-9抗原，也不生成癌胚抗原（CEA）。ＮＣＩ－Ｈ７１６細(xì) 胞 是 人 結(jié) 直 腸 腺 癌 細(xì) 胞，是 一 種 由低分化的盲腸腺癌產(chǎn)生的細(xì)胞系，據(jù)報(bào)道細(xì)胞具 有 內(nèi) 分 泌 特 性，包括嗜鉻粒蛋白和胰高血糖素原的表達(dá)，并可由脂肪酸、糖調(diào)節(jié)蛋 白（ＧＲＰ）、膽 堿 能 激 動(dòng) 劑、ＰＫＡ 和 ＰＫＣ活化劑刺激分泌 ＧＬＰ－１。

細(xì)胞在本庫(kù)通過(guò)支原體檢測(cè)陰性（可供檢測(cè)報(bào)告）。
細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果：陰性；真菌檢測(cè)結(jié)果：陰性
細(xì)胞在本庫(kù)通過(guò)STR檢測(cè)無(wú)誤（可供檢測(cè)報(bào)告）。
STR鑒定結(jié)果：
Amelogenin: X
D5S818:11
D13S317: 8,11
D7S820: 10,11
D16S539: 11,12
vWA: 16,17
TH01: 6,9.3
TPOX: 8,11
CSF1PO: 11
D19S433: 15,18.2
D21S11: 32.2
D18S51: 15,16

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

人 白人男性器官： 盲腸疾病： 結(jié)直腸腺癌懸浮生長(zhǎng)（Suspension）56歲（56 years）淋巴母細(xì)胞樣，懸浮聚團(tuán)生長(zhǎng)

1）準(zhǔn)備MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基78%

優(yōu)質(zhì)胎牛血清20%

P/S青霉素-鏈霉素1%

MEMNEAA非必需氨基酸1%

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

1）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

癌癥（Carcinoma）