小鼠胚胎肝細(xì)胞
| 中文名稱 | 小鼠胚胎肝細(xì)胞 |
|---|---|
| 中文同義詞 | 小鼠胚胎肝細(xì)胞 |
| 英文名稱 | BNL 1NG A.2 |
| 英文同義詞 | BNL 1NG A.2;Mouse embryonic hepatocytes |
| CAS號(hào) | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS號(hào) | |
| 相關(guān)類別 | |
| Mol文件 | Mol File |
| 結(jié)構(gòu)式 |
小鼠胚胎肝細(xì)胞 性質(zhì)
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
小鼠胚胎肝細(xì)胞（BNL CL.2）培養(yǎng)步驟
小鼠胚胎肝細(xì)胞（BNL CL.2）培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）DMEM+10%FBS+1%P/S
2）培養(yǎng)條件：Atmosphere:Air,95%;CO2,5%，Temperature:37℃。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
4）Medium Renewal：every 2 to 3 days