毛乳頭是細(xì)胞中高活性的團(tuán)體。它來源于真皮的間葉細(xì)胞，位于毛囊的基部。毛乳頭能控制頭發(fā)生長(zhǎng)周期，誘導(dǎo)表皮毛囊發(fā)育并生成毛發(fā)纖維。培養(yǎng)早期，毛乳頭細(xì)胞能誘導(dǎo)毛發(fā)體外生長(zhǎng)，但進(jìn)一步培養(yǎng)，該特性消失。毛發(fā)生長(zhǎng)受到毛囊細(xì)胞與間葉上皮細(xì)胞間相互作用的調(diào)節(jié)。例如：毛乳頭細(xì)胞分泌的β干擾素抑制體外培養(yǎng)中外根鞘細(xì)胞的生長(zhǎng)。毛乳頭細(xì)胞的存在也受到信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響，激活的ERK和Akt促進(jìn)毛乳頭細(xì)胞的存活。

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。

5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。