糜胰蛋白酶 基本信息
中文名稱(chēng) | 糜胰蛋白酶 |
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中文同義詞 | 胰糜蛋白酶;胰蛋白酶/糜蛋白酶 |
英文名稱(chēng) | trysin-chymotrypsin |
英文同義詞 | trysin-chymotrypsin;Trypsin-Chymotrypsin;Trypsin-ChyMotrypsi |
CAS號(hào) | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號(hào) | 1806241-263-5 |
相關(guān)類(lèi)別 | 生物化學(xué)品;其他生化試劑;有機(jī)化工原料;冶療用酶;酶類(lèi);酶與輔酶 |
Mol文件 | Mol File |
結(jié)構(gòu)式 |
糜胰蛋白酶 性質(zhì)
化學(xué)性質(zhì)
糜蛋白酶系從鍺胰中獲得的糜蛋白酶和胰蛋白酶的混合晶體,具有兩種酶的性質(zhì),結(jié)晶可溶于生理鹽水,水溶液易失活,pH7~8活性最強(qiáng),干燥時(shí)比較穩(wěn)定,它是豬胰腺分泌的一種肽鏈內(nèi)切酶,具有糜蛋白酶和胰蛋白酶協(xié)同水解蛋白質(zhì)肽鏈的作用。水解酪蛋白的活力與牛α-糜蛋白酶相當(dāng),但其中所含糜蛋白酶水解苯甲酰酪氨酸乙酯的活力卻相當(dāng)于牛、羊糜蛋白酶的活力的3倍。豬胰蛋白 酶水解酯鍵的活力也與牛、羊糜蛋白的活力相似。注射用糜胰蛋白酶是糜胰蛋白酶再結(jié)晶濾餅經(jīng)透析、沉淀過(guò)濾,丙酮脫水3次再真空干燥制得的粉針劑。糜胰蛋白酶片為含糜胰蛋白酶的腸溶薄膜片。
用途
糜蛋白酶可用來(lái)治療各種炎癥如:對(duì)于慢性支氣管炎、支氣管哮喘、胃炎、宮頸炎、盆腔炎、化膿性中耳炎、角膜炎、前列腺炎、栓塞性靜肪炎、腦血栓形成等均有一定療效。對(duì)炎性水腫、血腫、術(shù)后粘連、潰瘍、血栓等也有一定療效。但是,注射時(shí)有局部刺激,可引起過(guò)敏反應(yīng)??诜r(shí)勿嚼碎,以免被胃蛋白酶破壞而失效。有嚴(yán)重肝功能障礙和血凝功能不正常者禁用。肌注,一日1~2次,每次5mg,以2ml苯甲醇注射液或生理鹽水溶解后注射,療程10~10日。用于預(yù)防或控制復(fù)發(fā),每周注射2~3次,每次5mg,外用:以生理鹽水溶解后紗布浸濕外敷,或與抗生素軟膏拌勻后涂紗布上外敷,每日換藥1~2次。
生產(chǎn)方法
提取將新鮮或冷凍鍺胰,解凍、洗凈并投入絞肉機(jī)絞碎,按照豬胰漿量加2倍量體積的硫酸溶液(0.125mol/L),攪拌均勻,攪拌下提取1h,調(diào)節(jié)PH3右左,于40放置過(guò)夜。次日,用雙層紗布過(guò)濾,濾渣用等體積冷硫酸溶液(0.125mol/L),重復(fù)提取1次,合并2次濾液,得提取液。豬胰臟H{2SO4;pH3;40→提取提取液
分段鹽析在不斷攪拌下,將提取液中逐漸加入工業(yè)用硫酸銨一定量,使硫酸銨的飽和度達(dá)25%。再加少量活性白陶土一定量助濾,放置低溫處,1d后過(guò)濾,濾液再加硫酸銨(CP)同上操作,得復(fù)2次,收集25%~65%飽和度沉淀部分,得粗制濾餅。
提取液(NH4)2SO4→分段鹽析粗制濾餅
透析、鹽析將粗濾餅用3倍體積的冷蒸餾水溶解,在低溫下對(duì)pH5.5的乙酸緩沖液(0.01mol/L)透析,過(guò)濾,在清液加硫酸銨(CP)一定量,至硫酸銨飽和度達(dá)65%,將沉淀抽濾,得透析濾餅。
粗制濾餅pH5.5;醋酸緩沖液;(NH4)2SO4 →透析;鹽析透析濾餅
鹽析、除雜質(zhì)將透析餅在3倍體積冷蒸餾水溶解,調(diào)節(jié)pH3~3.5,加硫酸銨(CP)一定量,至硫酸銨飽和度達(dá)25%,室溫下放置3~5h后,用0.5%活性炭助濾,得澄清濾液。然后在不斷攪拌下,將100ml的澄清濾液緩慢加入預(yù)熱至250左右的乙醇10ml(乙醇濃度達(dá)10%),在室溫下放置3h后過(guò)濾,得澄清濾液。
透析濾餅(NH4)2SO4乙醇;pH3→鹽析;去雜蛋白濾液
鹽析、透析、再鹽析濾液加硫酸銨(CP)一定量,使硫酸銨達(dá)65%飽和度,鹽析后過(guò)濾,得濾液。然后將硫酸在低溫下對(duì)pH5.5乙酸緩沖液(0.01mol/L)透析2d,過(guò)濾除去沉淀,清液加硫酸宛如(CP)至65%飽和度,再鹽析,過(guò)濾得濾餅。
濾液pH5.5;醋酸緩沖液;(NH4)2SO4→鹽析;透析;再鹽析濾餅
結(jié)晶、再結(jié)晶濾餅溶于3倍體積冷蒸餾水中,用硫酸(2.5mol/L)調(diào)節(jié)pH至3,用酸洗后滑石粉助濾,在不斷攪拌下,于澄清濾液的每100ml中緩慢加入33.3ml的飽和硫酸銨溶液,將渾濁過(guò)濾除去。濾液用氫氧化鈉(2mol/L)調(diào)節(jié)pH至6 ,再加入一定量飽和硫酸銨溶液至似混非混程度,于250C下放置,待2h后即有結(jié)晶析出,次日收集結(jié)晶,得結(jié)晶濾餅。按上述操作程序得復(fù)結(jié)晶1次,得二次結(jié)晶濾餅。
濾餅(NH4)2SO4;pH6;250→結(jié)晶;再結(jié)晶再結(jié)晶濾餅
透析、沉淀在結(jié)晶濾餅中加入適量的稀鹽酸,使之溶解。溶解后的濾餅對(duì)pH3~3.5的冰水透析,透析液濾清后,在低溫下,每100ml透析濾清液中緩慢加入95%乙醇(CP)70ML,沉淀離心、過(guò)濾,用丙酮脫水3次,真空干燥,得注射用結(jié)晶糜胰蛋白酶原料。收率4~7g/kg(豬胰)。
再結(jié)晶濾餅冰水;乙醇;pH3→透析;沉淀結(jié)晶糜胰蛋白酶
透析、沉淀在結(jié)晶母液加硫酸銨一定量,使硫酸銨至70%飽和度,過(guò)濾,濾餅同上操作,得外用糜胰蛋白酶原料。
再結(jié)晶母液(NH4)2SO470%→透析;沉淀外用糜胰蛋白酶原料