性質(zhì)

噻唑藍又稱噻唑蘭，英文名：Thiazolyl Blue，CAS號：298-93-1，分子量：414.322，分子式：C18H16BrN5S，熔點：195°C(dec.)(lit.)，為黃色或橙黃色粉末。微溶于甲醇中，但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解，易溶于DMSO中。

原理機制

1983年，Mosman首次報道了用噻唑藍染色法來測定細胞的生長和存活。噻唑藍是一種唑氮鹽，活細胞特別是增殖細胞通過線粒體脫氫酶(如琥珀酸脫氫酶和心肌黃酶)將黃色的噻唑藍還原成藍紫色的甲臢(Fomzan)[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑]，甲臢顆粒越多，藍紫色越深，用有機溶劑把顆粒溶解后，測定其光密度值，從而推測細胞濃度。死細胞或紅細胞無此能力。甲臢產(chǎn)生的量與活細胞數(shù)成正比，活化的細胞比靜止的細胞產(chǎn)生更多的甲臢。

應用

白麗等人采用噻唑藍法測定免疫偶合物對腫瘤細胞的殺傷作用研究中，將被測試物與腫瘤細胞共同孵育2h后撤去測試物，加入新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)48h，然后加入噻唑藍染液，4h后酶標儀測定。結(jié)果顯示所測試的兩種免疫偶合物對靶腫瘤有較強的細胞毒作用，這種作用明顯強于對非靶細胞的作用。所測定的兩種免疫偶合物具有臨床應用價值^[1]。

柳喆等人在噻唑藍顯色法測定肝細胞再生因子的活性一文中，采用改良的簡便、快速的噻唑藍比色分析法測定肝細胞再生刺激因子的活性和特異性。選用的細胞株為肝源性細胞一人肝癌細胞HTC7721和非肝源性細胞一人肺癌細胞A549，結(jié)果顯示肝細胞再生刺激因子對HTC7721細胞有增殖作用，而對人肺癌A549細胞不產(chǎn)生增殖現(xiàn)象^[2]。

何國群等人在研究噻唑藍比色法在檢測和評價化學物皮膚接觸致敏性中的應用中，將致敏物質(zhì)肉桂醛、DNCB和化妝品纖體精華液、防曬型營養(yǎng)水分別對BALB/c小鼠雙耳進行連續(xù)3d染毒，第5天取小鼠耳部淋巴結(jié)制備單細胞懸液，用噻唑藍比色法檢測淋巴細胞增殖，用方差分析進行比較。同時采用傳統(tǒng)實驗方法-局部封閉涂皮法對DNCB、纖體精華液與防曬型營養(yǎng)水進行皮膚變態(tài)反應試驗。結(jié)果顯示與溶劑對照組比較，肉桂醛與DNCB能引起淋巴細胞的顯著增殖，與空白對照組比較，纖體精華液與防曬型營養(yǎng)水未引起淋巴細胞明顯增殖，經(jīng)傳統(tǒng)實驗方法檢測證實，DNCB引起75%動物皮膚變態(tài)反應，而纖體精華液與防曬型營養(yǎng)水未引起動物皮膚變態(tài)反應^[3]。

參考文獻

[1]白麗,王晶,王濤. 噻唑藍法測定免疫偶合物對腫瘤細胞的殺傷作用[J]. 大理學院學報（醫(yī)學版）,2002,11(2):1-2,11. 

[2]柳喆,余環(huán),陳章林,等.噻唑藍顯色法測定肝細胞再生因子的活性[J].江西醫(yī)藥,1995,(06):321-322.

[3]何國群,黃瓊,黃俊明,等. 噻唑藍比色法測定化學物皮膚致敏性的研究[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志,2006,16(8):1007-1008. DOI:10.3969/j.issn.1004-8685.2006.08.057.